鸡产蛋下降综合征病毒NDA探针制备

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鸡产蛋下降综合征(EDS-76)病毒由鸭胚培养增殖,60%饱和度的(NH4)2SO4沉淀,经差速离心和蔗糖垫超速离心提纯病毒。蛋白酶K和SDS消化后,苯酚抽提、乙醇沉淀分离EDS-76病毒DNA。用HindⅢ、BamHI、PstI、EcoRI进行病毒DNA酶切图谱分析。EDS-76病毒DNA经PstI限制酸酶切与pUC19质粒载体连接,转化了JPA101大肠杆菌细胞,筛选带有插入片段的白色菌落,并将筛选的克隆进杆快速酶切鉴定;用光敏生物素标记制成探针。结果表明:所选克隆只与EDS-76病毒DNA杂交,克隆
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