【摘 要】
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背景与目的:无血清饥饿方法可以诱发细胞自噬,同时也可以引起细胞周期阻滞.虽然研究者们对细胞自噬与细胞周期已经进行了深入的研究,但是对于两者之间的关系还是知之甚少.本
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科,湖北,武汉,430030华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心肿瘤研究所,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心肿
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背景与目的:无血清饥饿方法可以诱发细胞自噬,同时也可以引起细胞周期阻滞.虽然研究者们对细胞自噬与细胞周期已经进行了深入的研究,但是对于两者之间的关系还是知之甚少.本研究旨在通过研究细胞周期素(Cyclin)在饥饿诱导的细胞发生自噬时表达的变化,来探讨自噬对细胞周期的影响.方法:对照组:d-Hanks液代替培养基饥饿诱导处于对数生长期的HeLa细胞,收获饥饿0、3、6、12 h的细胞.实验组:用d-Hanks液开始饥饿的同时加入3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA),收获饥饿0、3、6、12 h的细胞,用流式细胞术和Western blot法检测细胞周期素和特异性标记自噬的兔抗人微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC-3).结果:饥饿3 h对照组HeLa细胞中有LE-3表达,并随饥饿时间延长而逐渐增加.Cyclin E、Cyclin D3在饥饿3 h开始减少,在饥饿6 h降低至最低水平,而Cyclin A、Cyclin B1在饥饿6 h开始下降.实验组HeLa细胞在饥饿3 h时LC-3的表达水平较低,随饥饿时间的延长LC-3表达基本不变化,Cyclin D3、Cyclin E、Cyclin A、Cyclin B1表达的下降速度也较对照组减慢.结论:自噬参与饥饿诱导的Cyclin降解的水解过程,Cyclin D3、Cyclin E水解比Cyclin A、Cyclin B1出现早,降解速度快.
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