【摘 要】
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该作者在以往流感病毒型别、亚型鉴定 RT- PCR法的基础上 ,在 PCR反应中除加入型、亚型特异引物外 ,同时加入标记荧光的相应型、亚型特异核苷酸片段作为探针 ,探针杂交温度比
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该作者在以往流感病毒型别、亚型鉴定 RT- PCR法的基础上 ,在 PCR反应中除加入型、亚型特异引物外 ,同时加入标记荧光的相应型、亚型特异核苷酸片段作为探针 ,探针杂交温度比 PCR反应中复性温度高5℃ ,使其与 PCR产物杂交 ,而后利用 Tap酶内源性 5′→ 3′核酸酶活性 ,将未杂交
On the basis of previous influenza virus type and subtype identification RT-PCR method, besides adding type and subtype specific primers in the PCR reaction, the authors also added corresponding fluorescent nucleotide and subtype specific nucleotide fragments The probe and probe hybridization temperatures are 5 ° C higher than the annealing temperature in the PCR reaction to allow hybridization with the PCR product, followed by the endogenous 5 ’→ 3’ nuclease activity of the Tap enzyme, which will not hybridize
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