【摘 要】
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[目的]本文旨在明确林烟草(Nicotiana sylvestris)microRNA827 (miR827)及其靶基因的表达调控特征,揭示其靶基因在进化上的变异性及其功能,为全面解析植物磷信号途径提供新的
【机 构】
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南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部长江中下游植物营养与肥料重点实验室,江苏南京,210095
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[目的]本文旨在明确林烟草(Nicotiana sylvestris)microRNA827 (miR827)及其靶基因的表达调控特征,揭示其靶基因在进化上的变异性及其功能,为全面解析植物磷信号途径提供新的证据.[方法]基于本课题组前期工作从普通烟草(Nicotiana tabacum)中克隆到的miR827基因序列,采用生物信息学手段结合RACE和RT-qPCR,以及本氏烟草叶片表皮细胞瞬时表达和酵母突变体回补试验,对林烟草miR827的靶基因进行克隆,对miR827及其靶基因的表达模式、靶基因的定位和功能进行研究.[结果]获得林烟草miR827两个靶基因Ns-SPX-MFS1/2的cDNA全长序列,发现Ns-miR827受缺磷诱导表达,而Ns-SPX-MFS1和Ns-SPX-MFS2响应缺磷信号分别发生下调和上调.Ns-SPX-MFS1/2均定位于液泡膜和细胞核.此外,不论Ns-SPX-MFS1/2的开放阅读框全长或截去SPX结构域的2个基因片段均能回补酵母磷吸收突变株.[结论]miR827及其靶基因调控模块在物种进化中存在复杂的变异性,Ns-SPX-MFS1/2具有转运磷的活性,其可能通过介导液泡和细胞质间磷的转运实现对植株磷稳态的调控.
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