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目的:克隆小鼠钙网蛋白(CRT)并在E.coli中原核表达和纯化.方法:采用RT—PCR法从昆明鼠肝总RNA中克隆小鼠钙CRTcDNA,构建CRT原核表达质粒(pET-15b/CRT)并转化E.coli的Rossetta(DE3)菌株.IPTG诱导后,表达蛋白在变性条件下经Ni—NTA树脂亲和层析纯化,然后透析复性.分别用SDS-PAGE和Westernblot法鉴定CRT的表达和纯化.结果:从昆明鼠肝总RNA中成功克隆获得小鼠CRTcDNA,该cDNA序列被成功克隆入pET-15b原核表达载体.DNA测