CYP3A5通过影响cyclin D1蛋白表达水平促进胰腺癌细胞增殖

• 作 者: 朱建伟 孔祥毓 孔凡扬 朱惠云 安薇 吴洪玉 李兆申 金震东
• 机 构: 200433 上海，第二军医大学长海医院消化内科,200433 上海，第二军医大学长海医院消化内科,200433 上海，第二军医大学长海医院消化内科,200433 上海，第二军医大学长海医院消化内科,
• 出 处: 中华胰腺病杂志
• 发表日期: 2018年18期
• 关键词: Pancreatic neoplasms Cytochromes Cell proliferation CYP3A5 Cyclin D1

目的

探讨CYP3A5对胰腺癌细胞增殖的影响及其可能机制。

方法

采用蛋白质印迹法检测BxPC-3、FG、MDA28、8902、PANC1 5株胰腺癌细胞株CYP3A5蛋白表达，选取蛋白表达量最低的PANC1细胞和表达量最高的BxPC-3细胞分别进行CYP3A5过表达质粒转染和靶向CYP3A5的siRNA(siRNA-CYP3A5)转染，分别以空载质粒转染和非特异性siRNA(siRNA-NC)转染作为对照。采用CCK-8法和克隆形成实验检测CYP3A5过表达及表达抑制后对胰腺癌细胞增殖能力的影响。采用蛋白质印迹法及定量PCR法检测各组细胞周期调控基因cyclin E、cyclin D1及凋亡相关基因Bcl-2的蛋白和mRNA表达量。

结果

CYP3A5过表达质粒转染PANC1后细胞CYP3A5蛋白表达显著增加(1.66±0.14比1.00，P＝0.0021)。siRNA-CYP3A5转染BxPC-3细胞后CYP3A5蛋白表达显著下降(0.18±0.02比1.00，P<0.0001)。CYP3A5过表达组与空载质粒组PANC1细胞培养48、72 h的A₄₅₀值分别为1.36±0.05比1.15±0.03、2.10±0.09比1.42±0.03，过表达组显著高于空载质粒组，差异均有统计学意义(P值<0.005或0.001)；siRNA-CYP3A5转染组与siRNA-NC转染组BxPC-3细胞培养48、72 h的A₄₅₀值分别为0.62±0.01比0.77±0.03、0.83±0.01比1.18±0.02，siRNA-CYP3A5转染组显著低于siRNA-NC转染组，差异均有统计学意义(P值<0.05或<0.001)。过表达组PANC1细胞克隆形成率为(19.33±0.58)%，显著高于空载质粒组的(9.67±0.63)%；siRNA-CYP3A5组克隆形成率为(8.50±0.80)%，显著低于siRNA-NC组的(16.00±0.60)%，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。过表达组PANC1细胞cyclin D1蛋白表达量为2.00±0.11，显著高于空载质粒组的1.00；siRNA-CYP3A5组BxPC-3细胞cyclin D1蛋白表达量为0.45±0.04，显著低于siRNA-NC组的1.00，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。但CYP3A5过表达或抑制对cyclin D1 mRNA表达量以及cyclin E、Bcl-2蛋白和mRNA的表达均无影响。

结论

CYP3A5通过上调cyclin D1蛋白表达促进胰腺癌细胞增殖。