ITIH4基因重组慢病毒干扰系统的构建

• 作 者: 黄敏 王琪 张玮 李力
• 机 构: 广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,桂林医学院附属医院妇产科
• 出 处: 中国癌症防治杂志
• 发表日期: 2012年3期
• 关键词: 人类间α胰蛋白酶H4重链 慢病毒载体 SHRNA lnter-α-trypsin inhibitor H4 Lentiviral vector shRNA

目的构建ITIH4基因重组慢病毒干扰系统。方法选取干扰效果最佳的siRNA片段，设计shRNA结构，退火反应形成双链后采用T4DNA连结酶与线性化慢病毒载体Psico连接，转化大肠杆菌后提取质粒，并经质粒DNA测序和PCR鉴定重组质粒构建是否成功，转染293T细胞并测定培养上液的病毒滴度。结果测序结果显示，重组慢病毒干扰载体Psico／ITIH4测序结果与设计的shRNA序列完全一致，转染293T细胞后，其病毒滴度为9．5×10^3 IU／mL。结论成功地构建了ITIH4基因的重组慢病毒系统，为