目的 研究低分子肝素对体外培养的皮肤鳞状细胞癌A431细胞株生物学行为的影响.方法 通过不同浓度的低分子肝素处理A431细胞,筛选出最佳实验浓度.用最佳浓度低分子肝素处理A431后,分别用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,用流式细胞仪检测细胞增殖；用划痕、Transwell小室和黏附试验分别检测A431细胞的迁移和黏附；实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应、Western印迹和双抗体夹心酶联免疫吸附法检测细胞内血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平,进行方差分析与t检验.结果 低分子肝素影响癌细胞活力的最佳浓度为200 IU/ml,用其处理A431细胞后,细胞活性降低,细胞周期阻滞,GI期细胞比率显著增加,S期细胞比率明显降低；低分子肝素组A431细胞增殖指数在48 h和72 h分别为23.41±5.51和11.76±5.13,均显著低于相应未处理组(分别为48.62±4.50和46.86±3.51,两组比较,t值分别为6.14和9.78,P值均＜0.05).低分子肝素组A431细胞中VEGF mRNA表达(48 h和72 h分别为10.16±0.07和4.11±0.01)显著少于相应未处理组(分别为18.77±0.11和17.39±0.05,两组比较,t值分别为114.38和451.10,P值均＜0.05),VEGF蛋白表达(分别为0.16±0.01和0.12±0.01)、VEGF分泌量(分别为67.17±3.34 ng/L和28.14±3.14 ng/L)亦显著少于相应未处理组(分别为0.20±0.01和0.21±0.01,122.63±23.17 ng/L和86.76±1.18 ng/L,P值均＜0.05).低分子肝素组A431细胞黏附率在48 h和72 h分别为29.7％±1.92％和17.5％±0.79％,均显著低于相应未处理组(分别为36.9％±0.35％和34.6％±0.96％,P值均＜0.05),并在24h、48 h和72 h后显著抑制了细胞迁移.结论 低分子肝素通过降低A431细胞活性、减少细胞VEGF表达,抑制A431细胞的增殖、迁移和黏附。
低分子肝素对A431细胞株生物学行为的干预研究
【摘 要】
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目的 研究低分子肝素对体外培养的皮肤鳞状细胞癌A431细胞株生物学行为的影响.方法 通过不同浓度的低分子肝素处理A431细胞,筛选出最佳实验浓度.用最佳浓度低分子肝素处理A431后,分别用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,用流式细胞仪检测细胞增殖；用划痕、Transwell小室和黏附试验分别检测A431细胞的迁移和黏附；实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应、Western印迹和双抗体夹心酶
【机 构】
：
江苏省海门市皮肤病防治医院,226100,226001南通大学附属医院皮肤科,226001南通大学附属医院皮肤科,南通大学医学院病理学系
【出 处】
：
中华皮肤科杂志
【发表日期】
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2012年45期
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