小牛胸腺抑裂素的提取及生物学活性的研究

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hdu07095238
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应用42%乙醇沉淀(Ⅰ法)、42%乙醇沉淀继以氯仿抽提(Ⅱ法)或制备丙酮粉后再以42%乙醇沉淀(Ⅲ法)的方法自小牛胸腺分离並部份纯化了胸腺抑裂素28批。经鉴定Ⅰ法及Ⅲ法制得的制品对小鼠胸腺细胞3H-TdR的自动掺入均具有抑制作用,而Ⅱ法所得制品则大多无抑制活性,按同样方法制得的小牛肾脏制品则不具抑制活性。制品对3H-TdR掺入的抑制依赖于制品的浓度但与小牛血清的存在无关。锥兰排除试验、补体依赖细胞毒性试验以及抑制活性可被逆转的事实说明,制品对3H-TdR掺入的抑制不是由于细胞毒所致。此外制品对PHA或同种抗原刺激下的正常人外周血淋巴细胞3H-TdR的掺入也具有抑制作用。

制品的紫外吸收特点,3,5-二羟甲苯呈色反应,聚丙烯酰胺凝胶电泳以及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳行为均显示其为不可透析的大分子蛋白质,其主要成份的分子量约在70,000左右,並且尚含有核酸。但制品通过DEAE-Sephadex A50层析或超滤虽可进一步分划成若干电泳行为及分子量不同的组份,其抑制活性却並未能得到进一步的集中;同时制品对热及酸硷的稳定性均提示活性组份可能是一种与蛋白质或核酸相结合而存在的小肽或化学本质未明的小分子物。

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