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【摘要】 目的 观察康成贴膏对急性软组织损伤的影响，为其临床应用提供一定的实验依据。 方法 制备软组织损伤动物模型并开展皮下血斑吸收实验，观察康成贴膏活血化瘀、血斑吸收作用。结果 康成贴膏中、高剂量组在给药后，与模型组相比，软组织损伤程度明显减轻，血斑面积减小，血斑消失时间显著缩短。结论 康成贴膏能具有活血化瘀，促进皮下血斑吸收作用。
【关键词】 康成贴膏；动物模型；软组织损伤
Experimental studies on Kang-cheng tiegao in treating soft tissue injuries
【Abstract】 Objective In order to observe the influence of Kang-cheng tiegao(KCTG) on soft tissue injuries healing. Methods soft tissue injury mode1 was established and the subcutaneous ecchymosis absorption effect was investigated. Results The injury of soft tissue was significantly alleviated in the medium and high dosage treatment groups with less blood spots area and shorter recovery time after administration. Conclusions The result suggested that Kang-cheng tiegao could facilitate the soft tissue injuries healing.
【Keywords】 Kang-cheng tiegao; animal model; soft tissue injuries
引言
软组织损伤是一种常见、多发病，临床表现为局部肿胀、疼痛、功能障碍、青紫、瘀斑等，对其处理以对症治疗为主。非甾体类药物(NSALD )是临床常用药物，这些药物治疗软组织损伤能缓解疼痛，但临床研究表明长期服用阿司匹林、吲哚美辛等传统非甾体类抗炎药往往会产生多种不良反应 [1,2] ，存在安全性问题，且疗效往往不甚满意。
在近千年的医疗实践活动中，中医药学积累了大量的临床经验，在软组织损伤的治疗上有显著的效果[3]. 软组织损伤属于祖国医学“伤筋”的范畴，多由于气滞血瘀所致，治疗上多采用理气活血，消肿止痛的药物。本实验采用活血化瘀，补肾健骨的中药贴剂——康成贴膏，开展软组织损伤模型实验研究，以观察康成贴膏对软组织损伤性镇痛作用、软组织活血化瘀作用及皮下血斑吸收作用。
1 材料与方法
1.1 材料
康成贴膏：苏州康成医药有限公司产品，3.95 克生药/片，批号：060401。临用前用医用凡士林（天津市大茂化学试剂厂，500g/罐，批号：20051121）配制成所需浓度。
阳性对照药：云南白药膏，云南白药集团无锡药业有限公司，国药准字Z20073015，10cm×6.5cm，批号：070749。
脱毛膏：上海诗碧化妆品有限公司，60ml/支，卫妆特字：（2002）第0043号，批号：50060001。
昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18－22克，清洁级，SD大鼠，雌雄兼用，180-220g，均由苏州大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证：XCYK（苏）2002－0008，实验动物使用许可证：SYXK（苏）2002－0037。
1.2 实验方法
1.2.1 软组织损伤的活血化瘀作用研究 参照文献方法[4]，作适当改进，制备大鼠急性软组织损伤模型：取大鼠固定，取1根直径为1.8cm、长160cm 的空心管竖直置于大白鼠左侧后肢软组织上(实验前1天局部用脱毛剂脱毛)，然后将1个重约50g钝头砝码，自上向下自由落体击中大白鼠左后肢软组织，共3 次，造成面积约4cm2大小有明显皮下出血、瘀斑及肿胀的非开放性软组织损伤模型。
造模第二天，大鼠左后肢局部肿胀明显，并可见瘀斑，将有明显肿胀及皮下瘀斑的大鼠随机均分为5组：即空白对照组，康成贴膏低、中、高剂量组（即0.33g/Kg,0.66g/Kg和1.32g/Kg组），云南白药组。空白对照组不做任何处理；康成贴膏组均在大鼠损伤左后肢敷以涂有不同浓度药膏（5g/Kg）的纱布，纱布面积约16cm2，然后敷以透气薄膜，并用透气胶布、绷带包扎固定，每天换药1次，每次保持10h；云南白药组每只用药膏0.25贴。给药后第2、4、6天观察局部软组织损伤程度并分级。分级标准:“-”无明显肿胀和瘀斑；“+”局部无肿胀，隐约可见瘀斑；“+ +”局部肿胀厚度在对侧肢体同部位厚度1倍以下，可见瘀斑；“+ + +”局部肿胀厚度在对侧肢体同部位厚度1倍以上和/或有明显紫色瘀斑。
1.2.2 皮下血斑吸收的影响 参照文献方法[5]，作适当改进，制备小鼠背部皮下血斑模型：用脱毛液将各小鼠背部脱毛约3cm×3cm，1d后，眼眶静脉丛穿刺，用1ml注射器取血0.1mL（注射器以50u/mL肝素生理盐水0.1mL抗凝），皮下注射于同一小鼠背部脱毛处，形成自体血液所致的皮下血斑（面积约2－3cm2）。
将制成皮下血斑模型的小鼠60只，随机均分为5组：空白对照组，康成贴膏低、中、高剂量组，云南白药膏组，每组12只，雌雄各半。造模4h后，测定小鼠背部血斑面积，作为给药前血斑面积。空白对照组不做任何处理，其余各实验组立即给药。康成贴膏低、中、高剂量组每日在血斑上部敷贴不同浓度的药膏10g/kg体重（即0.66g /kg、1.32g /kg、2.64g/kg），面积约2cm×2cm，阳性对照组敷贴等面积云南白药膏，每次保持10h，连续给药7d，并每天测定血斑面积1次。给药3d后即有部分小鼠出现血斑消失，计为3d，按此类推，第7d消失计为7d，7d仍未消失者，按7d计，最后统计血斑平均消失天数。
1.2.4 统计方法 实验数据在SPSS11.0软件中采用Ridit分析[6]，各组与模型组比较。组间差异采用t检验，实验数据以均数±标准差表示。
2 实验结果
2.1 消肿化瘀作用 大鼠造模1d后，局部瘀斑、肿胀明显，造模3d后，局部瘀斑仍明显，造模7d后局部瘀斑、肿胀减退（图1）。各组大鼠给药第2，4，6d局部损伤程度均有不同程度减轻的趋势，其中康成贴膏中、高剂量组在给药第4d和6d，局部肿胀消退，瘀斑缩小，与模型组相比，软组织损伤程度明显减轻（p<0.05，p<0.01）。提示康成贴膏0.66、1.32g生药/kg有明显的活血化瘀、促进损伤软组织恢复的作用。（表1，图1——图4）
表1 肉眼观察康成贴膏对大鼠急性软组织损伤的影响（n=10） Table 1 Influence on acute soft tissue injury
2.2 小鼠皮下血斑吸收影响实验
各组小鼠造模4小时后，小鼠背部注射部位可见紫色血瘀斑块，形状呈不规则圆形，约2-3cm2。给药1d，2d，3d后，各组血斑面积均有减小的趋势，其中康成贴膏中剂量组给药3d后和高剂量组给药1d，2d，3d后，与模型组组相比，血斑面积明显减小（p<0.05）。康成贴膏高剂量组缩小血斑面积的作用与阳性对照相当（p<0.05）。此外，康成贴膏低、中、高剂量组血斑消失时间均较模型组缩短，中、高剂量组对皮下血斑吸收作用显著（p<0.05），但不优于阳性对照。提示康成贴膏具有一定的活血化瘀的功效。（表2）
表2 康成贴膏对小鼠皮下血斑吸收的影响（n＝12）
Table4 Influence on blood spots absorption
*P<0.05，**P<0.01，与空白对照组比较
3 讨论
软组织损伤可由扭伤或挫伤引起，损伤部位韧带、筋膜、关节囊等撕裂伤，致使局部出血，出现皮下青紫、肿胀、疼痛、功能障碍等主要表现 [7]。外力作用于机体局部，一方面可直接造成局部组织细胞变性坏死；另一方面由于局部血液循环系统的破坏，创伤性无菌性炎症反应和局部水肿等原因使局部内环境改变组织细胞缺氧，代谢紊乱，也会继续引起组织细胞的变性坏死，加重局部组织的损伤，由于致痛物质及水肿刺激神经末梢而致痛[8]。临床表现常伴有疼痛，肿胀，淤血等功能障碍。
中医称软组织损伤为“筋伤”。 中国传统医学认为，急性伤筋以后血离经脉，经络受阻瘀血不散，气血流行不通，“不通则痛”。因而在治疗时必须使经络畅通运行，局部瘀血消散，受伤组织得以气血濡养，通则不痛[9]。因此，活血、化瘀、通气类的药物对软组织损伤有治愈的疗效。
本实验选择康成贴膏，主要由血竭、儿茶、乳香、没药、当归、川芎、麝香、冰片、牛膝等活血、化瘀、通气类中草药组成，经过熬制组成的复方膏剂。复方中的当归、川芎，能活血散瘀，麝香能解痉止痛，改善微循环，促进血流，利于血肿吸收，加速组织新陈代谢。复方组成共同对软组织损伤肿胀，淤血起到疗效。
本实验结果表明，康成贴膏能显著缩短血斑消失时间，对软组织损伤具有治愈作用，值得在临床应用推广。
参考文献
[1]McGettigan P，Henry D．Curret problems with norrspecific Coxinhbitors[J].Curr Pharm Des，2000，6(17)：724—1693．
[2]Sharma S，Prasad A，Anand K S，et a1．Nonsteroidal anti-in-flammatory drugs in the managenment of pain and inflamma-tion：a basis for drug selection[J].J Am Ther，1999，6(1)：1-3
[3]张根印，王国毓．消肿膏治疗急性软组织损伤的临床研究[J]．陕西中医学院学报，2003，26(5)：46．
[4]李卫星，谭大琦，李秋华等.消瘀止痛膏对大鼠急性软组织损伤的治疗作用[J].中医正骨，2000，12（11）：11-12.
[5] 冯穗生，谭毓治，何冰等.骨友灵贴膏药效学研究.广东药学院学报[J]，2004，20（1）：42-44.
[6]刘军祥，苏卫红.用SPSS对有序分类资料进行Ridit分析[J].泸州医学院学报，2005，28（5）：471-472.
[7] 陈隆恩.缺血骨骼肌修复的电子显微镜观察[J].中华外科杂志，1996，24(6)：274．
[8] 庄 洪.外用双柏散浸剂治疗急性软组织损伤的实验研究[J].中医正骨，1992，4(2)：2．
[9] 陈迎春，高绍芳，邱淑珍.舒筋涂剂治疗急性软组织损伤的实验研究[J].陕西中医，2009，30（4）：490-491.
作者简介: 孙志红，女，(1959-）， 技师
通信作者:薛智谋, 教授 , 研究方向: 人类疾病动物模型建立研究
项目基金:江苏省自然科学基金L221603710
【关键词】 康成贴膏；动物模型；软组织损伤
Experimental studies on Kang-cheng tiegao in treating soft tissue injuries
【Abstract】 Objective In order to observe the influence of Kang-cheng tiegao(KCTG) on soft tissue injuries healing. Methods soft tissue injury mode1 was established and the subcutaneous ecchymosis absorption effect was investigated. Results The injury of soft tissue was significantly alleviated in the medium and high dosage treatment groups with less blood spots area and shorter recovery time after administration. Conclusions The result suggested that Kang-cheng tiegao could facilitate the soft tissue injuries healing.
【Keywords】 Kang-cheng tiegao; animal model; soft tissue injuries
引言
软组织损伤是一种常见、多发病，临床表现为局部肿胀、疼痛、功能障碍、青紫、瘀斑等，对其处理以对症治疗为主。非甾体类药物(NSALD )是临床常用药物，这些药物治疗软组织损伤能缓解疼痛，但临床研究表明长期服用阿司匹林、吲哚美辛等传统非甾体类抗炎药往往会产生多种不良反应 [1,2] ，存在安全性问题，且疗效往往不甚满意。
在近千年的医疗实践活动中，中医药学积累了大量的临床经验，在软组织损伤的治疗上有显著的效果[3]. 软组织损伤属于祖国医学“伤筋”的范畴，多由于气滞血瘀所致，治疗上多采用理气活血，消肿止痛的药物。本实验采用活血化瘀，补肾健骨的中药贴剂——康成贴膏，开展软组织损伤模型实验研究，以观察康成贴膏对软组织损伤性镇痛作用、软组织活血化瘀作用及皮下血斑吸收作用。
1 材料与方法
1.1 材料
康成贴膏：苏州康成医药有限公司产品，3.95 克生药/片，批号：060401。临用前用医用凡士林（天津市大茂化学试剂厂，500g/罐，批号：20051121）配制成所需浓度。
阳性对照药：云南白药膏，云南白药集团无锡药业有限公司，国药准字Z20073015，10cm×6.5cm，批号：070749。
脱毛膏：上海诗碧化妆品有限公司，60ml/支，卫妆特字：（2002）第0043号，批号：50060001。
昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18－22克，清洁级，SD大鼠，雌雄兼用，180-220g，均由苏州大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证：XCYK（苏）2002－0008，实验动物使用许可证：SYXK（苏）2002－0037。
1.2 实验方法
1.2.1 软组织损伤的活血化瘀作用研究 参照文献方法[4]，作适当改进，制备大鼠急性软组织损伤模型：取大鼠固定，取1根直径为1.8cm、长160cm 的空心管竖直置于大白鼠左侧后肢软组织上(实验前1天局部用脱毛剂脱毛)，然后将1个重约50g钝头砝码，自上向下自由落体击中大白鼠左后肢软组织，共3 次，造成面积约4cm2大小有明显皮下出血、瘀斑及肿胀的非开放性软组织损伤模型。
造模第二天，大鼠左后肢局部肿胀明显，并可见瘀斑，将有明显肿胀及皮下瘀斑的大鼠随机均分为5组：即空白对照组，康成贴膏低、中、高剂量组（即0.33g/Kg,0.66g/Kg和1.32g/Kg组），云南白药组。空白对照组不做任何处理；康成贴膏组均在大鼠损伤左后肢敷以涂有不同浓度药膏（5g/Kg）的纱布，纱布面积约16cm2，然后敷以透气薄膜，并用透气胶布、绷带包扎固定，每天换药1次，每次保持10h；云南白药组每只用药膏0.25贴。给药后第2、4、6天观察局部软组织损伤程度并分级。分级标准:“-”无明显肿胀和瘀斑；“+”局部无肿胀，隐约可见瘀斑；“+ +”局部肿胀厚度在对侧肢体同部位厚度1倍以下，可见瘀斑；“+ + +”局部肿胀厚度在对侧肢体同部位厚度1倍以上和/或有明显紫色瘀斑。
1.2.2 皮下血斑吸收的影响 参照文献方法[5]，作适当改进，制备小鼠背部皮下血斑模型：用脱毛液将各小鼠背部脱毛约3cm×3cm，1d后，眼眶静脉丛穿刺，用1ml注射器取血0.1mL（注射器以50u/mL肝素生理盐水0.1mL抗凝），皮下注射于同一小鼠背部脱毛处，形成自体血液所致的皮下血斑（面积约2－3cm2）。
将制成皮下血斑模型的小鼠60只，随机均分为5组：空白对照组，康成贴膏低、中、高剂量组，云南白药膏组，每组12只，雌雄各半。造模4h后，测定小鼠背部血斑面积，作为给药前血斑面积。空白对照组不做任何处理，其余各实验组立即给药。康成贴膏低、中、高剂量组每日在血斑上部敷贴不同浓度的药膏10g/kg体重（即0.66g /kg、1.32g /kg、2.64g/kg），面积约2cm×2cm，阳性对照组敷贴等面积云南白药膏，每次保持10h，连续给药7d，并每天测定血斑面积1次。给药3d后即有部分小鼠出现血斑消失，计为3d，按此类推，第7d消失计为7d，7d仍未消失者，按7d计，最后统计血斑平均消失天数。
1.2.4 统计方法 实验数据在SPSS11.0软件中采用Ridit分析[6]，各组与模型组比较。组间差异采用t检验，实验数据以均数±标准差表示。
2 实验结果
2.1 消肿化瘀作用 大鼠造模1d后，局部瘀斑、肿胀明显，造模3d后，局部瘀斑仍明显，造模7d后局部瘀斑、肿胀减退（图1）。各组大鼠给药第2，4，6d局部损伤程度均有不同程度减轻的趋势，其中康成贴膏中、高剂量组在给药第4d和6d，局部肿胀消退，瘀斑缩小，与模型组相比，软组织损伤程度明显减轻（p<0.05，p<0.01）。提示康成贴膏0.66、1.32g生药/kg有明显的活血化瘀、促进损伤软组织恢复的作用。（表1，图1——图4）
表1 肉眼观察康成贴膏对大鼠急性软组织损伤的影响（n=10） Table 1 Influence on acute soft tissue injury
2.2 小鼠皮下血斑吸收影响实验
各组小鼠造模4小时后，小鼠背部注射部位可见紫色血瘀斑块，形状呈不规则圆形，约2-3cm2。给药1d，2d，3d后，各组血斑面积均有减小的趋势，其中康成贴膏中剂量组给药3d后和高剂量组给药1d，2d，3d后，与模型组组相比，血斑面积明显减小（p<0.05）。康成贴膏高剂量组缩小血斑面积的作用与阳性对照相当（p<0.05）。此外，康成贴膏低、中、高剂量组血斑消失时间均较模型组缩短，中、高剂量组对皮下血斑吸收作用显著（p<0.05），但不优于阳性对照。提示康成贴膏具有一定的活血化瘀的功效。（表2）
表2 康成贴膏对小鼠皮下血斑吸收的影响（n＝12）
Table4 Influence on blood spots absorption
*P<0.05，**P<0.01，与空白对照组比较
3 讨论
软组织损伤可由扭伤或挫伤引起，损伤部位韧带、筋膜、关节囊等撕裂伤，致使局部出血，出现皮下青紫、肿胀、疼痛、功能障碍等主要表现 [7]。外力作用于机体局部，一方面可直接造成局部组织细胞变性坏死；另一方面由于局部血液循环系统的破坏，创伤性无菌性炎症反应和局部水肿等原因使局部内环境改变组织细胞缺氧，代谢紊乱，也会继续引起组织细胞的变性坏死，加重局部组织的损伤，由于致痛物质及水肿刺激神经末梢而致痛[8]。临床表现常伴有疼痛，肿胀，淤血等功能障碍。
中医称软组织损伤为“筋伤”。 中国传统医学认为，急性伤筋以后血离经脉，经络受阻瘀血不散，气血流行不通，“不通则痛”。因而在治疗时必须使经络畅通运行，局部瘀血消散，受伤组织得以气血濡养，通则不痛[9]。因此，活血、化瘀、通气类的药物对软组织损伤有治愈的疗效。
本实验选择康成贴膏，主要由血竭、儿茶、乳香、没药、当归、川芎、麝香、冰片、牛膝等活血、化瘀、通气类中草药组成，经过熬制组成的复方膏剂。复方中的当归、川芎，能活血散瘀，麝香能解痉止痛，改善微循环，促进血流，利于血肿吸收，加速组织新陈代谢。复方组成共同对软组织损伤肿胀，淤血起到疗效。
本实验结果表明，康成贴膏能显著缩短血斑消失时间，对软组织损伤具有治愈作用，值得在临床应用推广。
参考文献
[1]McGettigan P，Henry D．Curret problems with norrspecific Coxinhbitors[J].Curr Pharm Des，2000，6(17)：724—1693．
[2]Sharma S，Prasad A，Anand K S，et a1．Nonsteroidal anti-in-flammatory drugs in the managenment of pain and inflamma-tion：a basis for drug selection[J].J Am Ther，1999，6(1)：1-3
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[4]李卫星，谭大琦，李秋华等.消瘀止痛膏对大鼠急性软组织损伤的治疗作用[J].中医正骨，2000，12（11）：11-12.
[5] 冯穗生，谭毓治，何冰等.骨友灵贴膏药效学研究.广东药学院学报[J]，2004，20（1）：42-44.
[6]刘军祥，苏卫红.用SPSS对有序分类资料进行Ridit分析[J].泸州医学院学报，2005，28（5）：471-472.
[7] 陈隆恩.缺血骨骼肌修复的电子显微镜观察[J].中华外科杂志，1996，24(6)：274．
[8] 庄 洪.外用双柏散浸剂治疗急性软组织损伤的实验研究[J].中医正骨，1992，4(2)：2．
[9] 陈迎春，高绍芳，邱淑珍.舒筋涂剂治疗急性软组织损伤的实验研究[J].陕西中医，2009，30（4）：490-491.
作者简介: 孙志红，女，(1959-）， 技师
通信作者:薛智谋, 教授 , 研究方向: 人类疾病动物模型建立研究
项目基金:江苏省自然科学基金L221603710