基因修饰对鸡新城疫病毒F48E9株HN基因DNA疫苗表达效力的影响

• 作 者: 贺笋 石星明 王云峰 王攻 冉多良 童光志
• 机 构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,新疆农业大学动物医学学院
• 出 处: 生物工程学报
• 发表日期: 2008年2期
• 关键词: NDV DNA疫苗 密码子优化 信号肽 间接免疫荧光 免疫印迹 NDV DNA vaccine codon optimization signal pep
• 基金项目: 致谢 感谢中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室的彭金美老师提供的pVAX1载体,张强博士提供的293T细胞!

DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量和免疫原性有直接关系，为了提高目的基因的表达量，本研究对NDV F48E9株的HN基因进行了修饰，对修饰前后HN基因表达水平进行了比较。利用分子生物学软件将NDVF48E9株的HN基因的密码子全部替换为鸡体内偏嗜性密码子，同时在HN基因的5’端加上同样已替换密码子的禽流感病毒HA蛋白信号肽序列以期望提高目的蛋白在细胞中的表达。修饰后HN基因命名为SoptiHN，剔除信号肽的HN基因命名为optiHN。将SoptiHN、optiHN和F48E9株的HN基因分别克隆到真核