miR-141-3p靶向调控DAPK1对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞增殖与凋亡的影响

来源 :中国性科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aji_y
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目的 探究miR-141-3p对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞增殖与凋亡的影响及其机制.方法 选取雌性SD大鼠20只,随机分为对照组和模型组,每组10只.模型组构建大鼠PCOS模型,提取两组大鼠的卵巢颗粒细胞,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定两组大鼠颗粒细胞中miR-141-3p表达水平.将模型组大鼠卵巢颗粒细胞分别转染miR-141-3p mimic和miR-141-3p mimic NC并分为两组,采用MTT法检测两组细胞增殖、克隆形成实验检测两组细胞活力、流式细胞术检测两组细胞凋亡水平.采用生物信息学筛选miR-141-3p的靶基因,双荧光素酶报告实验和Western Blot验证靶基因;体外过表达和低表达DAPK1后检测细胞增殖能力变化;转染miR-141-3p mimic后过表达DAPK1,检测细胞增殖、活力和凋亡水平.结果 模型组大鼠卵巢颗粒细胞miR-141-3p表达水平低于对照组(P<0.001);转染miR-141-3p mimic后细胞增殖和细胞克隆形成数显著增加(P<0.05),细胞凋亡水平显著下降(P<0.001);筛选并验证DAPK1为miR-141-3p的靶基因,miR-141-3p可抑制DAPK1表达;过表达DAPK1后细胞增殖能力降低,抑制DAPK1表达后细胞增殖增加(P<0.05);过表达DAPK1后miR-141-3p引起的细胞增殖、克隆形成和凋亡水平的变化均被显著逆转(P<0.05).结论 miR-141-3p可通过靶向DAPK1影响PCOS大鼠卵巢颗粒细胞的增殖与凋亡.
其他文献
不明原因不孕症(UI)指夫妇有规律性生活且未采取任何避孕措施1年未孕,并经过常规的3大不孕因素筛查而未能明确不孕病因的不孕状态.UI是排除性诊断,只是排除了精液、排卵和输卵管通畅性的问题,并非没有原因.受孕的过程极其复杂精妙,受到多个环节的影响,而宫腔作为胚胎着床的部位,是不容忽视的重要因素之一.目前研究认为,子宫动脉血流、子宫肌瘤、子宫内膜息肉、子宫内膜炎等均对子宫内膜容受性产生影响.在UI中,这些因素同样重要,但阴道超声的局限性使这些问题未被有效评估及处理.现就临床工作中常被忽视而又与UI相关的宫腔因