郁金香ISSR-PCR体系建立与优化

• 作 者: 巨秀婷 阿啟兰
• 机 构: 青海大学高原花卉研究中心
• 出 处: 分子植物育种
• 发表日期: 2016年4期
• 关键词: ISSR-PCR 郁金香 退火温度 遗传多样性 模板 引物 DNA 标记技术 正交设计试验 影响因素

本研究以22个郁金香品种为材料,采用正交设计试验和单因素试验对ISSR-PCR反应中的5个影响因素:Mg2+、d NTPs、Taq酶、引物、模板DNA进行4个水平的优化试验。结果表明最佳反应体系为:25μL体系中Mg2+1.0 mmol/L、d NTPs 0.15 mmol/L、Taq酶0.25U、引物0.2μmol/L、模板DNA 100 ng。退火温度为58℃。该体系的建立有利于ISSR分子标记技术研究郁金香种质资源遗传多样性。