新型免疫抑制剂FC-007对胶质母细胞瘤增殖、凋亡和侵袭的影响及其机制

• 作 者: 杨福伟 孙利波 陈广永 张金男
• 机 构: 吉林大学中日联谊医院神经外科，长春 130033,吉林大学中日联谊医院神经外科，长春 130033,吉林大学中日联谊医院神经外科，长春 130033,吉林大学中日联谊医院神经外科，长春 130033
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2021年38期
• 关键词: 胶质母细胞瘤 增殖 凋亡 侵袭

目的

探讨新型免疫抑制剂FC-007对胶质母细胞瘤(GBM)增殖、凋亡和侵袭的影响及其分子机制。

方法

体外培养胶质母细胞瘤细胞株U87MG和U118MG，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同浓度FC-007(0、0.1、0.5、1、5、10、50、100 μmol/L)处理胶质瘤细胞后的细胞增殖活性。应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度FC-007(0、10、20 μmol/L)对U87MG和U118MG细胞周期和凋亡的影响。应用蛋白质印迹法(Western blot)检测不同浓度FC-007(0、25、50、100 μmol/L)对基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达的影响，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测FC-007不同浓度(0、5、10、20 μmol/L)对Nrf2及其下游基因HO-1、NQO-1表达水平的影响。组间比较采用F检验。

结果

CCK-8结果显示，FC-007作用48 h后U87MG和U118MG细胞株增殖抑制浓度(IC₅₀)分别为9.77、11.10 μmol/L，FCM结果显示，随FC-007浓度增加，处于G₀/G₁期的细胞比例显著高于空白对照组，处于S期的细胞比例显著低于空白对照组，G₂/M期无明显改变，差异均有统计学意义(F＝121.962、125.478、129.653、120.516、129.340、122.425，P<0.05)；FC-007干预胶质瘤细胞24 h后，在0、10、20 μmol/L浓度下，细胞凋亡率分别为，U87MG细胞(6.41±0.35)%、(18.43±1.27)%、(26.11±1.74)%；U118MG细胞(5.02±0.75)%、(28.49±5.60)%、(33.35±4.12)%，差异均有统计学意义(F＝265.502、260.378，P<0.05)。Western blot结果显示，FC-007显著降低MMP-2、MMP-9蛋白的表达，差异均有统计学意义(F＝178.835、182.098、175.229、186.427，P<0.05)。RT-qPCR结果显示，FC-007可抑制GBM细胞中Nrf2及其下游基因HO-1及NQO-1的表达，差异均有统计学意义(F＝185.998、187.835、182.642、188.517、187.556、182.475，P<0.05)。

结论

FC-007可降低MMP-2、MMP-9蛋白水平，降低Nrf2、HO-1、NQO-1的mRNA表达，以剂量时间依赖关系抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖，促进细胞凋亡，并可将细胞周期阻滞在G₀/G₁期。