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【摘 要】用麦克马斯特法对每克粪便中的虫卵进行计数。结果：藏獒肠道寄生虫总感染率为47.52%。藏獒肠道寄生虫感染率高，感染虫种数目多，寄生虫的防制工作应引起饲养和管理藏獒犬工作者的重视。
【关键词】藏獒；肠道寄生虫；感染
藏獒又称藏狗，其体型高大，性情固执，经训练后表现出良好的工作性能。寄生虫病是危害藏獒健康的主要疾病之一，且易诱发其他疾病，延长病程，严重者导致犬的死亡。为了解藏獒肠道寄生虫病，笔者对四川和郑州共8个藏獒养殖场进行肠道寄生虫调查。现将调查结果报道如下。
1.材料与方法
1.1实验地点、时间
本试验在河南农业大学牧医工程学院兽医寄生虫学实验室进行。
1.2样品来源
试验中所查样品来源于四川和郑州共8个藏獒养殖场。采集每只藏獒新鲜粪便10～30g左右，分别装入干净塑料袋，编号并做好详细信息登记，带回实验室，置4℃冰箱中保存待检。
1.3主要仪器设备
低速自动平衡台式离心机、低速离心机、电热鼓风干燥箱、药物天平、生物显微镜、冰箱、40目不锈钢粪筛、试管架、离心管、玻璃漏斗、烧杯、玻璃染色缸、铁丝吊环、载玻片、盖玻片、标签纸、数码相机。
1.4主要试剂及其制备
饱和蔗糖溶液的配制： 卢戈氏碘溶液的制备：改良抗酸染色法染液的配制：第一液：石炭酸品红染色液；第二液：10%硫酸脱色液；第三液：2%孔雀绿原液。
1.5检查方法
1.5.1甲醛-乙酸乙酯沉淀法
操作步骤：
①取3-5g粪便样品，加30mL自来水混匀、过滤至50mL离心管内，3000r·min-1离心3min。
②弃上部液体，沉淀中加甲醛加甲醛10mL，乙酸乙酯4mL，充分搅拌混匀，3000r·min-1离心3min。
③溶液分为4层，倾去上3层，加自来水至35mL，搅拌均匀，3000r·min-1離心3min。倾去上清液。
④然后采用碘液直接涂片染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法进行检查。
1.5.2卢戈氏碘液染色法
在洁净的载玻片上滴一滴碘液，用一次性筷子挑取绿豆大小的经甲醛-乙酸乙酯沉淀法处理过的粪便块在碘液中涂成均匀粪膜，加盖玻片，于400倍光镜检查。
1.5.3饱和蔗糖溶液漂浮法
取2-3g新鲜粪便样品，加30mL自来水充分搅拌混匀，经40目不锈钢粪筛过滤至50mL离心管内；3000r·min-1离心3min；弃上清，保留沉淀物；于沉淀物中加30mL饱和蔗糖漂溶液，充分搅匀，3000r·min-1离心5min；用铁丝吊环蘸取表层漂浮液置载玻片上，加盖玻片，于400倍光镜检查。
1.5.4改良抗酸染色法
取经过滤和离心沉淀后的沉淀物进行涂片，室温下干燥，滴加甲醇固定，自然晾干。 将经固定过的自然晾干的涂片浸入第一液，5min后水洗； 浸入第二液，脱色1min为宜，脱色至淡粉红色，水洗； 浸入第三液，2min后水洗，50℃烘干或自然晾干； 光学显微镜检查。
1.6感染强度测定
采用麦克马斯特氏法对阳性粪便样品中的虫卵或卵囊进行计数，在低倍镜下用计数器将两个计数室内见到的的虫卵或卵囊全部数完，取平均值乘以200，即为每克粪便中的虫卵数（EPG）或卵囊数（OPG）。未对贾第虫和隐孢子虫进行计数。
2.结果
2.1各种肠道寄生虫感染情况
本次调查对202只藏獒犬的新鲜粪便进行肠道寄生虫感染情况调查发现，寄生虫总感染率为47.52%（96/202），共发现9种肠道寄生虫，原虫3种，蠕虫6种。96份阳性粪便样品中34份为混合感染，其中15份为2种寄生虫混合感染，感染率为7.42%（15/202）；9份为3种寄生虫混合感染，感染率为9.41%（19/202）；发现混合感染寄生虫虫种最多者可同时感染4种寄生虫，6份属于此种情况，所占比例为2.97%（6/202）。四川地区藏獒养殖场藏獒肠道寄生虫感染率最高，为52.38%，中牟和郑州地区藏獒感染率分别为34.38%和61.18%。详见表1。
表 1 不同采样点藏獒犬肠道寄生虫感染分布情况
2.2肠道寄生虫感染强度
采用麦克斯特氏法对阳性样品虫卵或卵囊计数，其中球虫卵囊最大OPG值为3200个，蛔虫卵最大EPG值为4700个，钩虫卵EPG值高达9600个，圆线虫卵、鞭虫卵、复孔绦虫卵和带绦虫卵EPG值均小于200，未对贾第虫和隐孢子虫进行感染强度测定。详见表2。
表 2 藏獒犬肠道寄生虫感染强度情况
2.3不同年龄段感染情况
不同年龄段藏獒肠道寄生虫感染情况存在差异，因为藏獒是在18月龄之后发育成熟为成年犬，因此我们将样本检测结果分为以下三个年龄段进行统计：详见表3。
表 3 不同年龄段犬寄生虫感染情况
2.4 不同性别藏獒犬的寄生虫感染情况
雌雄犬各检查了95和107只，感染数各为22和27只。详见表4。
表 4 不同性别藏獒犬的感染情况
3.讨论
3.1藏獒犬肠道寄生虫总感染情况
不同地区犬肠道寄生虫感染率存在差异，主要感染虫种也不同，与寄生虫的流行病学特点有关，我国幅员辽阔，气候与地理环境复杂，地区的发展进程存在差异，因此寄生虫病的流行和扩散也存在差异。本次调查中发现，幼年藏獒犬肠道寄生虫感染率显著高于成年犬。随着犬年龄的增长，其抵抗力增强，加上定期驱虫，这可能是成年寄生虫感染率降低原因。粪检结果表明，公母犬差异不显著。
3.2综合防治措施
同其它任何传染病一样，藏獒肠道寄生虫病的危害需要采取综合的防治措施，我们认为对藏獒的肠道寄生虫病应该采取以下防治措施：（1）犬粪便进行管理，应集中堆积发酵；清理犬粪便时一定要戴手套。（2）鱼要加热后再喂犬。（3）犬感染寄生虫后要及时隔离，及时治疗。（4）人不要与犬过于亲密，人与犬接触后一定要洗手。（5）建议养犬者每年驱虫。在此基础上，加强寄生虫病危害和防病知识的宣传，藏獒犬寄生虫病在我国的危害才会逐渐减轻，最终得到有效的控制。■
【关键词】藏獒；肠道寄生虫；感染
藏獒又称藏狗，其体型高大，性情固执，经训练后表现出良好的工作性能。寄生虫病是危害藏獒健康的主要疾病之一，且易诱发其他疾病，延长病程，严重者导致犬的死亡。为了解藏獒肠道寄生虫病，笔者对四川和郑州共8个藏獒养殖场进行肠道寄生虫调查。现将调查结果报道如下。
1.材料与方法
1.1实验地点、时间
本试验在河南农业大学牧医工程学院兽医寄生虫学实验室进行。
1.2样品来源
试验中所查样品来源于四川和郑州共8个藏獒养殖场。采集每只藏獒新鲜粪便10～30g左右，分别装入干净塑料袋，编号并做好详细信息登记，带回实验室，置4℃冰箱中保存待检。
1.3主要仪器设备
低速自动平衡台式离心机、低速离心机、电热鼓风干燥箱、药物天平、生物显微镜、冰箱、40目不锈钢粪筛、试管架、离心管、玻璃漏斗、烧杯、玻璃染色缸、铁丝吊环、载玻片、盖玻片、标签纸、数码相机。
1.4主要试剂及其制备
饱和蔗糖溶液的配制： 卢戈氏碘溶液的制备：改良抗酸染色法染液的配制：第一液：石炭酸品红染色液；第二液：10%硫酸脱色液；第三液：2%孔雀绿原液。
1.5检查方法
1.5.1甲醛-乙酸乙酯沉淀法
操作步骤：
①取3-5g粪便样品，加30mL自来水混匀、过滤至50mL离心管内，3000r·min-1离心3min。
②弃上部液体，沉淀中加甲醛加甲醛10mL，乙酸乙酯4mL，充分搅拌混匀，3000r·min-1离心3min。
③溶液分为4层，倾去上3层，加自来水至35mL，搅拌均匀，3000r·min-1離心3min。倾去上清液。
④然后采用碘液直接涂片染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法进行检查。
1.5.2卢戈氏碘液染色法
在洁净的载玻片上滴一滴碘液，用一次性筷子挑取绿豆大小的经甲醛-乙酸乙酯沉淀法处理过的粪便块在碘液中涂成均匀粪膜，加盖玻片，于400倍光镜检查。
1.5.3饱和蔗糖溶液漂浮法
取2-3g新鲜粪便样品，加30mL自来水充分搅拌混匀，经40目不锈钢粪筛过滤至50mL离心管内；3000r·min-1离心3min；弃上清，保留沉淀物；于沉淀物中加30mL饱和蔗糖漂溶液，充分搅匀，3000r·min-1离心5min；用铁丝吊环蘸取表层漂浮液置载玻片上，加盖玻片，于400倍光镜检查。
1.5.4改良抗酸染色法
取经过滤和离心沉淀后的沉淀物进行涂片，室温下干燥，滴加甲醇固定，自然晾干。 将经固定过的自然晾干的涂片浸入第一液，5min后水洗； 浸入第二液，脱色1min为宜，脱色至淡粉红色，水洗； 浸入第三液，2min后水洗，50℃烘干或自然晾干； 光学显微镜检查。
1.6感染强度测定
采用麦克马斯特氏法对阳性粪便样品中的虫卵或卵囊进行计数，在低倍镜下用计数器将两个计数室内见到的的虫卵或卵囊全部数完，取平均值乘以200，即为每克粪便中的虫卵数（EPG）或卵囊数（OPG）。未对贾第虫和隐孢子虫进行计数。
2.结果
2.1各种肠道寄生虫感染情况
本次调查对202只藏獒犬的新鲜粪便进行肠道寄生虫感染情况调查发现，寄生虫总感染率为47.52%（96/202），共发现9种肠道寄生虫，原虫3种，蠕虫6种。96份阳性粪便样品中34份为混合感染，其中15份为2种寄生虫混合感染，感染率为7.42%（15/202）；9份为3种寄生虫混合感染，感染率为9.41%（19/202）；发现混合感染寄生虫虫种最多者可同时感染4种寄生虫，6份属于此种情况，所占比例为2.97%（6/202）。四川地区藏獒养殖场藏獒肠道寄生虫感染率最高，为52.38%，中牟和郑州地区藏獒感染率分别为34.38%和61.18%。详见表1。
表 1 不同采样点藏獒犬肠道寄生虫感染分布情况
2.2肠道寄生虫感染强度
采用麦克斯特氏法对阳性样品虫卵或卵囊计数，其中球虫卵囊最大OPG值为3200个，蛔虫卵最大EPG值为4700个，钩虫卵EPG值高达9600个，圆线虫卵、鞭虫卵、复孔绦虫卵和带绦虫卵EPG值均小于200，未对贾第虫和隐孢子虫进行感染强度测定。详见表2。
表 2 藏獒犬肠道寄生虫感染强度情况
2.3不同年龄段感染情况
不同年龄段藏獒肠道寄生虫感染情况存在差异，因为藏獒是在18月龄之后发育成熟为成年犬，因此我们将样本检测结果分为以下三个年龄段进行统计：详见表3。
表 3 不同年龄段犬寄生虫感染情况
2.4 不同性别藏獒犬的寄生虫感染情况
雌雄犬各检查了95和107只，感染数各为22和27只。详见表4。
表 4 不同性别藏獒犬的感染情况
3.讨论
3.1藏獒犬肠道寄生虫总感染情况
不同地区犬肠道寄生虫感染率存在差异，主要感染虫种也不同，与寄生虫的流行病学特点有关，我国幅员辽阔，气候与地理环境复杂，地区的发展进程存在差异，因此寄生虫病的流行和扩散也存在差异。本次调查中发现，幼年藏獒犬肠道寄生虫感染率显著高于成年犬。随着犬年龄的增长，其抵抗力增强，加上定期驱虫，这可能是成年寄生虫感染率降低原因。粪检结果表明，公母犬差异不显著。
3.2综合防治措施
同其它任何传染病一样，藏獒肠道寄生虫病的危害需要采取综合的防治措施，我们认为对藏獒的肠道寄生虫病应该采取以下防治措施：（1）犬粪便进行管理，应集中堆积发酵；清理犬粪便时一定要戴手套。（2）鱼要加热后再喂犬。（3）犬感染寄生虫后要及时隔离，及时治疗。（4）人不要与犬过于亲密，人与犬接触后一定要洗手。（5）建议养犬者每年驱虫。在此基础上，加强寄生虫病危害和防病知识的宣传，藏獒犬寄生虫病在我国的危害才会逐渐减轻，最终得到有效的控制。■