【摘 要】
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目的 建立一种特异、敏感、快速地检测致腹泻肠道腺病毒F亚属的巢式PCR方法,了解引起肠道致腹泻感染中腺病毒的携带情况. 方法 根据腺病毒F亚属基因编码序列,设计一对通用引
【机 构】
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湖南省华容县疾病预防控制中心,岳阳市疾病预防控制中心
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目的 建立一种特异、敏感、快速地检测致腹泻肠道腺病毒F亚属的巢式PCR方法,了解引起肠道致腹泻感染中腺病毒的携带情况. 方法 根据腺病毒F亚属基因编码序列,设计一对通用引物扩增靶基因片段,扩增后片段长度为520 bp,另根据相对保守序列设计一对特异性的引物以第一次PCR扩增后的产物为模板,再进行PCR扩增,片段长度为300 bp.通过ABI3130基因检测仪来评价该方法的特异性;对腺病毒模板做10倍比系列稀释后进行巢式PCR检测,并对其敏感性进行分析,对PCR扩增产物进行电泳和测序鉴定. 结果肠道致腹泻肠道感染中通过巢式PCR扩增反应可检出腺病毒F亚属,通过基因序列测定证实了PCR产物的特异性;在敏感性检测中PCR检测肠道腺病毒模板的下限为2.08×10-4μg/ml. 结论本研究建立了一个快速、特异、敏感的肠道腺病毒PCR检测方法,适用于流行病学调查及临床检测.
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