【摘 要】
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根据GenBank中的牛型布鲁氏杆菌OMP10序列，设计一对引物，以布鲁氏菌疫苗株s2全基因组DNA为模板扩增OMPIO基因，将目的基因克隆人pEASY—T3，经测序正确后，与载体pET-32a（＋）连接，构建重组
【机 构】
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山东农业大学动物科技学院,山东省农业科学院奶牛研究中心,中国兽医药品监察所
【基金项目】
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公益性行业（农业）科研专项（200903027）,现代农业（奶牛）产业技术体系科学家岗位项目
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根据GenBank中的牛型布鲁氏杆菌OMP10序列，设计一对引物，以布鲁氏菌疫苗株s2全基因组DNA为模板扩增OMPIO基因，将目的基因克隆人pEASY—T3，经测序正确后，与载体pET-32a（＋）连接，构建重组表达质粒pET-32a／OMP10，转化EcoliBL21（DE3），用ItrFG诱导表达融合蛋白pET-32a／OMP10，经SDS—PAGE及Western—blot分析鉴定后，采用Ni—NTASpinKit纯化目的蛋白，并免疫小鼠。结果表明，成功构建了含OMP10的表达载体，经多次对表达条
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