论文部分内容阅读
目的构建分泌型核心蛋白聚糖（DCN）真核表达载体，并观察其在肝癌细胞HepG2中的表达和抗肿瘤作用。方法应用PCR技术扩增DCN全长基因cDNA片段，与pcDNA3．1载体连接，并转化到大肠杆菌中扩增获得重组载体，应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体，脂质体介导转染HepG2，经G418筛选建立稳定转染细胞株，采用RT-PCR、免疫组化检测其表达。MTT检测细胞增殖活力，流式细胞仪分析细胞周期。结果RT-PCR可见转染组细胞mRNA表达明显增多，免疫组化可见转染组细胞DCN蛋白表达明显增高。细胞生长曲