树鼩白细胞介素6的原核表达、纯化及免疫原性鉴定

• 作 者: 龙琼 徐盟 郝嘉茂 毕研伟 肖红剑 李智华 闫玲梅 丁晨 李
• 机 构: 中国医学科学院&,北京协和医学院医学生物学研究所,吉林省万通药业四川分公司,昆明医科大学海源学院
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 2017年6期
• 关键词: 树鼩 白细胞介素-6 原核表达 纯化 免疫原性 tree shrew interleukin-6 prokaryotic expression purif
• 基金项目: 基金项目:北京协和医学院“协和青年基金”(3332015147),中国医学科学院医学与健康科技创新工程(重大协同创新项目)(2016-I2M-013)

目的：克隆树鼩白细胞介素6（IL-6）基因，在大肠杆菌中高效表达、纯化，并鉴定免疫原性。方法：根据Gen?Bank预测的树鼩IL-6基因序列设计引物并扩增基因，克隆至原核表达载体pET-30a（+），构建的重组表达质粒pET-30a（+）-IL-6转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导表达；表达的融合蛋白经Ni柱纯化后，Western印迹和ELISA检测其免疫原性，并检测不同组织中IL-6的分布情况。结果：酶切及测序证实重组表达质粒pET-30a（+）-IL-6构建正确；表达的重组蛋白相对分子质量约为29&#