蛇床子素诱导ROS抑制胰腺癌细胞周期进展和增殖

• 作 者: 姚俊 魏毅君 周放 杨健 李德春 周健
• 机 构: 苏州大学附属第一医院普外科 215006,苏州大学附属第一医院普外科 215006,苏州大学附属第一医院普外科 215006,苏州大学附属第一医院普外科 215006,苏州大学附属第一医院普外科 21
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2019年36期
• 关键词: 蛇床子素 胰腺癌 氧化应激 增殖

目的

探讨蛇床子素(Ost)对panc-1细胞的氧化应激损伤和作用机制。

方法

以不同浓度Ost作用panc-1细胞，以Alamar blue方法检测细胞增殖活力；锥虫蓝计数方法检测细胞活力；流式细胞技术检测细胞活性氧(ROS)含量和细胞周期；蛋白质印迹法(Western blot)检测panc-1细胞周期蛋白(Cyclin) D1、Cyclin D3和Notch1的表达，统计方法采用单因素方差分析。

结果

panc-1细胞在Ost作用下增殖活力下降，且浓度依赖，10、20、40、80、120、160、200 μmol/L浓度的药物抑制率分别为(0.095±0.056)%、(0.164±0.033)%、(0.201±0.034)%、(0.267±0.037)%、(0.537±0.028)%、(0.732±0.015)%、(0.936±0.002)%。流式细胞术结果表明ROS随浓度提高而上升，且能被抗氧化剂(NAC)有效逆转，ROS值为0 μmol/L：17.700±0.795；80 μmol/L：19.750±0.101；NAC＋80 μmol/L：17.850±0.236。锥虫蓝计数分析细胞活力下降，0 μmol/L：100.000±7.536；80 μmol/L：65.610±4.351；NAC＋80 μmol/L：76.110±1.603。Ost作用48 h后，G₀/G₁期升高，0 μmol/L：(57.920±2.091)%、120 μmol/L：(70.090±1.558)%；G₂/M期降低，0 μmol/L：(26.080±1.674)%、120 μmol/L：(16.730±0.781)%。这种作用也能被NAC抑制，NAC＋120 μmol/L组的G₀/G₁期为(64.700±2.191)%，G₂/M期为(22.390±1.657)%。在蛋白水平也显示Cyclin D1(40 μmol/L：0.804±0.067；80 μmol/L：0.462±0.118)、Cyclin D3(40 μmol/L：0.845±0.035；80 μmol/L：0.372±0.096)相对表达量下降。另外，Western blot也表明Ost能下调Notch1蛋白的相对表达量(40 μmol/L：0.949±0.027；80 μmol/L：0.586±0.043)，所示结果差异均有统计学意义(P<0.05)。

结论

Ost能升高panc-1细胞ROS，呈浓度依赖性，通过阻滞细胞周期抑制增殖。