【摘 要】
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目的 建立人巨噬细胞系(U937)与人脐静脉血管内皮细胞系(ECV304)体外共培养模型,以伴刀豆球蛋白A(ConA)作为U937细胞激活剂,观察其调节血管生成的可行性.方法 培养EEV304细胞
【机 构】
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南方医科大学南方医院烧伤科,沈阳武警辽宁总队医院烧伤科,广州中山大学第一附属医院烧伤科
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划);
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目的 建立人巨噬细胞系(U937)与人脐静脉血管内皮细胞系(ECV304)体外共培养模型,以伴刀豆球蛋白A(ConA)作为U937细胞激活剂,观察其调节血管生成的可行性.方法 培养EEV304细胞至60%融合,分别加入ConA 25 μg/mL、U937细胞(1×103个)、U937细胞(1×103个)+ConA 25 μg/mL,共同培养48 h.以常规培养的ECV304细胞为对照组.用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的变化;采用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法检测内皮细胞DNA合成情况;用反转录-聚合酶链反应技术检测内皮细胞同源盒HOXB2基因mRNA的表达. 结果 ConA+U937细胞可使ECV304细胞S期百分比升高至(48.860±2.290)%,与对照组(41.590±2.590)%比较,差异有统计学意义(P＜0.01);DNA合成亦明显增加[放射性荧光闪烁计数值为(5694±917)min-1],与对照组[(2498±1109)min-1]比较,差异有统计学意义(P＜0.01);内皮细胞HOXB2基因mRNA的表达水平为0.947±0.003,与对照组0.646±0.004比较,差异有统计学意义(P＜0.01).各组细胞凋亡率相近(P＞0.05) 结论经ConA活化的U937细胞可促进ECV304细胞增殖进而调节血管生成,HOXB2与内皮细胞增殖有密切关系.
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