Pokemon表达慢病毒载体的构建及鉴定

• 作 者: 祖旭字 刘文 谭晶晶
• 机 构: 南华大学附属第一医院临床医学研究所
• 出 处: 中南医学科学杂志
• 发表日期: 2013年4期
• 关键词: POKEMON 慢病毒载体 基因治疗 293T细胞 Pokemon Lentivirus Gene therapy 293T cell
• 基金项目: 国家自然科学基金项目（81272355）、湖南省自然科学基金（11JJ4068）和湖南省教育厅青年项目（128108）.

目的构建Pokemon表达慢病毒载体。方法通过PCR扩增PokemoneDNA，将PokemoneDNA连接于GVl65载体，经测序确认后，将GVl65／Pokemon与pHelper1．0和pHelper2．0共转染至293T细胞中，收获病毒，通过RealtimePCR测定滴度；将Pokemon表达慢病毒载体侵染293T细胞通过免疫荧光和Westernblot检测Pokemon表达慢病毒载体的转染效率和Pokemon的表达能力。结果在感染Pokemon慢病毒载体293T细胞中能检查到Pokemon—GF