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目的 观察不完全射频消融后缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(ATⅡ)增殖能力和生物学功能的影响.方法 取小鼠ATⅡ细胞分为4组,进行体外培养,培养温度分别为37、50、60、70℃,模拟体内射频消融后消融灶周围不同区域肺组织的温度变化.采用噻唑蓝(MTT)法和划痕实验观察4组ATⅡ的增殖和迁移,应用基因转染技术将HIF-1α转入ATⅡ,检测HIF-1α表达对ATⅡ调控增殖作用和生物学功能的影响.通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测HIF-1 αmRNA在ATⅡ中的表达水平.采用HIF-1α特异性抑制剂YC-1作用于ATⅡ,抑制ATⅡ中的HIF-1α表达,采用Western blot和Real-time PCR测定转染后ATⅡ中行溴化脱氧尿嘧啶核苷(BrdUrd)、碱性磷酸酶(AKP)和活性标志物表面活性蛋白C(SPC)的表达变化,观察YC-1对ATⅡ增殖和生长的影响.结果 (1)经37、50、60、70℃分别加热10 min和30 min时,ATⅡ增殖能力的意志率分别为0、(18.79±2.56)％、(43.27±4.94)％、(58.72±6.19)％和0、(44.58±3.81)％、(65.49±7.03)％、(75.13±6.45)％.不同组间比较差异有统计学意义(P＜0.05),同一组间不同作用时间比较差异也有统计学意义(P＜0.05).(2)划痕实验:经高温处理的ATⅡ迁移能力低于正常细胞(P＜0.05).(3) Real-time PCR:随着处理ATⅡ的温度越高,ATⅡ中HIF-1α表达越强,而BrdUrd、AKP和SPC等反映ATⅡ增殖再生能力指标的激活被抑制,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)通过转染实验将HIF-1α真核表达载体成功导入ATⅡ,HIF-1α转染的ATⅡ逐渐出现凋亡,48 h后ATⅡ数量明显减少.将A组分别与B、C组比较,组间细胞数量的差异有统计学意义(P＜0.05).(5)将HIF-1α特异性抑制剂YC-1作用于3组ATⅡ细胞,Real-time PCR法检测A组的BrdUrd、AKP和SPC mRNA表达水平明显升高,A组为2.87±0.47、2.46±0.51和2.92±0.55,B组为1.71 ±0.32、1.63 ±0.29和1.85±0.38,C组为1.62±0.30、1.56±0.25和1.80 ±0.31.显示YC-1抑制了HIF-1α的表达,ATⅡ的增殖能力显著提高,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 培养温度的升高可以抑制ATⅡ的增殖能力,ATⅡ转染HIF-1α后增殖能力减弱,抑制HIF-1α表达后ATⅡ的增殖能力有所恢复.