小拟南芥实时荧光定量PCR(qRT-PCR)内参基因的筛选

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jili7315
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小拟南芥(Arabidopsis pumila),又名无苞芥(Olimarabidopsis pumila),为拟南芥的近缘物种。选择合适的内参基因对于提高实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析基因表达的准确性至关重要。本研究在分析小拟南芥叶片转录组数据的基础上,筛选了12个表达稳定的候选内参基因,包括肌动蛋白1(actin-1,ACT-1)、α-微管蛋白1(α-tubulin,TUA1)、β-微管蛋白6(β-tubulin,TUB6)、翻译起始因子(translation initiation factor 2,IF2)、延伸因子1-α(elongation factor 1-alpha,EF1-α)、聚泛素14(polyubiquitin 14,UBQ14)、UBQ9、泛素连接酶35(ubiquitin-conjugating enzyme 35,UBC35)、转录起始因子1(transcription initiation factor,HAF1)、FK506结合蛋白62(FK506 binding protein 62,FKBP62)、miR319a和醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)。我们分别利用Norm Finder、Genorm和Bestkeeper软件分析了这12个基因在dH2O、NaCl处理下及小拟南芥不同组织中的表达稳定性。研究表明,在dH2O处理条件下表达稳定的基因为TUB6和FKBP62,在Na Cl处理条件下为EF1-α和IF2,在组织器官中为HAF1,这些基因适合作为相应试验条件下小拟南芥的内参基因。本研究为小拟南芥基因表达分析提供了可靠的内参基因,具有重要的参考价值。
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