【摘 要】
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[目的]研究口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)poly(C)区段的序 列长度与RMDV毒力之间的关系.[方法]首先利用Nhe I/Not I线化FMDV Pgem-XJ/AKT/69全长重组质粒,
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[目的]研究口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)poly(C)区段的序 列长度与RMDV毒力之间的关系.[方法]首先利用Nhe I/Not I线化FMDV Pgem-XJ/AKT/69全长重组质粒,制备体外转录本,借助Lipofectamine 2000转染BHK-21细胞,获得基因工程毒.随后,在细胞传代过程中,收取不同代数病毒培养液,提取总RNA进行poly(C)的长度测定,并进行乳鼠致病性试验和BHK-21细胞TCIDS.的测定.结果 我们发现,基因工程毒在BHK-21上连续传代至第6代时,可见明显的致细胞病变效应(cytoPathic effect,CPE);在经过一代乳鼠接种之后再重新适应到BHK-21细胞的过程中,poly(C)区段出现了缩短现象;乳鼠致病性试验和BHK-21细胞TCIDS.测定结果表明,尽管基因工程毒与母本毒相比毒力偏低,但含有不同长度poly(C)的基因工程毒之间并无显著差异.[结论]poly(C)区段的序列长度在12-17个C之间改变对FMDV基因工程毒的毒力无明显的影响.
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