【摘 要】
：
目的模拟体内肝脏发生发育的环境和条件,建立以细胞因子为主的体外诱导培养体系,探讨骨髓干细胞体外转化肝细胞的可行性.方法获取小鼠骨髓干细胞,建立以细胞因子为细胞诱导的
【机 构】
：
南京大学医学院附属南京鼓楼医院肝胆外科,南京大学医学院附属南京鼓楼医院科研部
论文部分内容阅读
目的模拟体内肝脏发生发育的环境和条件,建立以细胞因子为主的体外诱导培养体系,探讨骨髓干细胞体外转化肝细胞的可行性.方法获取小鼠骨髓干细胞,建立以细胞因子为细胞诱导的培养体系.在细胞培养过程中,观察细胞形态和数量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝细胞特异性基因的表达,Western blot和流式细胞仪检测ALB和CK18在蛋白水平的表达情况.糖元染色法行细胞糖原染色、尿素合成试验检测细胞的合成和代谢功能.结果在诱导培养12 d,可以观察到多极性的肝细胞样细胞,且细胞逐渐增多、集落不断增大.诱导细胞在培养7 d开始表达AFP mRNA并维持到第21天,此后表达逐渐减弱;培养7天开始表达ALB mRNA和CK18mRNA,随着培养时间的延长表达不断增强;培养14 d开始表达TTR mRNA,随着培养时间的延长表达不断增强.通过Western blot检测,诱导21 d的细胞表达ALB和CK18蛋白,流式细胞术分析ALB阳性细胞的比例为60.45%,CK18阳性细胞的比例为67%.诱导培养21 d,细胞胞浆内可见红染的糖原颗粒;诱导培养6 d,细胞开始合成尿素,尿素合成功能随诱导时间的延长而增强,于第15天达到高峰.结论我们建立的以细胞因子FGF、HGF、OSM、EGF为主的细胞诱导培养体系能促使骨髓干细胞定向转化为肝细胞.
其他文献
目的监测高温与细菌脂多糖复合应激大鼠生命体征与动脉血气等指标的动态变化特点。方法雄性SPF级Wistar大鼠随机分为:常温生理盐水组(C组)、高温生理盐水组(H组)、常温细菌脂
目的探讨联合血管切除的胰十二指肠切除术的方法及临床意义.方法回顾性总结61例联合血管切除的胰十二指肠切除术经验.结果联合血管切除的胰十二指肠切除术围手术期死亡率为4.
目的探讨我国东北地区杜氏型肌营养不良症(DMD)及贝克型肌营养不良症(BMD)患者抗肌营养不良蛋白基因缺失类型分布与表型的关系,并用于产前基因诊断。方法采用多重PCR法检测12
目的研究铝对体外培养神经细胞的毒作用,探讨铝的神经毒性和毒作用机制.方法分别应用浓度为10、100、1 000 μmol/L的AlCl3对原代培养大鼠皮层神经细胞染毒24、48 h,检测AlCl
目的研究小儿在轮状病毒急性感染期的免疫应答特点。方法采用ELISA方法检测血浆和粪便轮状病毒特异性抗体,流式细胞术进行淋巴细胞亚群分析,采用荧光定量RTPCR方法检测外周血
目的探讨中药黄芩苷体外诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经元样细胞分化的可行性及其可能的机制。方法采集健康孕妇足月顺产儿的脐带血,共5人份,以肝素抗凝,采用明胶沉降加
目的探讨下肢慢性静脉功能不全(CVI)患者外周血红细胞CD35和中性粒细胞CD11b表达的意义.方法采用全血流式细胞技术分析42例患者和8例正常对照者在临床、病因、解剖和病理生理
目的对循环酶法同型半胱氨酸测定试剂盒进行临床应用评价,以确定其分析性能是否符合临床实验室应用的要求.方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS) 颁布的EP5-A, EP6
随着我国经济发展水平以及科技水平的不断进步，我国的电力行业也得到了迅速发展，电力系统逐渐朝着自动化，规模化的方向发展。与此同时，人们对于电力的需求也在不断的增加，对于电力
目的探讨Ⅳ期结直肠癌姑息性手术治疗效果和影响预后的因素。方法回顾性分析1999年8月至2004年3月诊治的78例Ⅳ期结直肠癌患者的临床病理资料。结果姑息性手术治疗组73例,未