sHLA-A＊0201-抗原肽四聚体的构建与功能检测

• 作 者: 翁秀芳 吴雄文 梁智辉 蔡蕾 费世江 陈国安 龚非力
• 机 构: 华中科技大学同济医学院免疫学系
• 出 处: 中国免疫学杂志
• 发表日期: 2006年3期
• 关键词: HLA-A＊0201-抗原肽复合物 生物素化 BirA HLA-A＊0201-抗原肽四聚体 抗原特异性CTL HLA-A＊0201-peptide comple
• 基金项目: 本课题受国家自然科学基金（30271201）和科技部973计划（2001CB510008）资助

目的：构建有功能的sHLA-A＊0201-抗原肽四聚体，建立一套HLA Ⅰ类分子／抗原肽的四聚体制备技术。方法：利用基因工程及体外折叠技术构建sHLA-A＊0201-LMP2A426-434复合物分子，并在BirA酶的作用下生物素化。与荧光标记的亲和素衍生物以分子数4：1结合而形成HLA-A＊0201-LMP2A426-434四聚体。获得的四聚体对长期混合淋巴细胞培养中增殖的抗原特异性CTL进行检测，同时用细胞毒实验验证。结果：荧光标记的亲和素与生物素化的HLA-A＊0201-抗原肽复合物分子正确结合，制