【摘 要】
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目的：构建人B型钠尿肽（BNP）表达质粒,用pET原核表达系统制备重组抗原TRX-BNP融合蛋白.方法：根据GenBank中检索到的人BNP成熟蛋白序列编码,设计合成编码BNP-32蛋白的DNA,并分别在5
【机 构】
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第二军医大学长海医院心血管内科,长海医院胸心外科
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目的：构建人B型钠尿肽（BNP）表达质粒,用pET原核表达系统制备重组抗原TRX-BNP融合蛋白.方法：根据GenBank中检索到的人BNP成熟蛋白序列编码,设计合成编码BNP-32蛋白的DNA,并分别在5＇端和3＇端设计EcoR I和HindⅢ酶切位点,经聚合酶链反应（PCR）、构建重组质粒pET32a.BNP,并在BL21（DE3）经IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和层析制备TRX-BNP.通过DNA测序、融合蛋白的相对分子质量分析及Western印迹来鉴定TRX-BNP质粒及表达的BNP抗原的正确性
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