【摘 要】
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目的:Pfs25蛋白是传播阻断型疟疾疫苗重要的候选抗原,然而,I期临床研究显示该蛋白在人体内只能激发较弱的免疫应答,如何提高Pfs25蛋白质的免疫原性成为研究重点。已有的研究
【机 构】
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国药集团兰州生物制品研究所有限责任公司,
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目的:Pfs25蛋白是传播阻断型疟疾疫苗重要的候选抗原,然而,I期临床研究显示该蛋白在人体内只能激发较弱的免疫应答,如何提高Pfs25蛋白质的免疫原性成为研究重点。已有的研究表明:体外通过化学偶联方法获得的Pfs25蛋白聚合物,能显著提高其免疫原性。方法:本文从基因水平,利用同尾酶的特性构建串联的Pfs25基因三拷贝融合基因(Pfs25)3,每个单拷贝基因由连接臂(linker)连接,以保证每个单体Pfs25蛋白的活性不受影响。构建重组质粒(Pfs25)3/pPICZαA[或(Pfs25)3/pGAPZaA]电转毕赤酵母菌,获得酵母重组体。在三角瓶规模表达重组菌并初步纯化了目的蛋白(Pfs25)3。结果:ELISA和SDS-PAGE检测表达上清,显示有弱阳性表达。获得了纯度为83%的纯品蛋白。结论:在毕赤酵母中实现了Pfs25基因的三拷贝串联表达,为恶性疟疾疫苗的研发奠定了基础。
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