【摘 要】
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目的 建立高表达白细胞介素2的基因工程人大肠癌细胞瘤苗,并完成相关的实验室鉴定.方法 采用重组逆转录病毒将人白细胞介素2基因转导至三株人大肠癌细胞,G418筛选并挑选单克
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科,上海交通大学医学院生化教研室
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目的 建立高表达白细胞介素2的基因工程人大肠癌细胞瘤苗,并完成相关的实验室鉴定.方法 采用重组逆转录病毒将人白细胞介素2基因转导至三株人大肠癌细胞,G418筛选并挑选单克隆,ELISA检测各单克隆24 h白细胞介素2表达量,用Student Newman Keuls检验三株细胞白细胞介素2的表达差异,PCR、Southern blot检测白细胞介素2基因整合,RT-PCR、Northern blot检测白细胞介素2基因转录水平.结果 获得72株G418抗性单克隆,其中表达量最高者为COLO205达138.01 ng/L×107/24 h,统计显示COLO205与SW1116、HT-29组间相比差异有统计学意义(P＜0.05),白细胞介素2基因整合至细胞基因组中,未发生重组或部分缺失,且获得成功表达.结论 本研究成功建立了高表达白细胞介素2的基因工程人大肠癌细胞瘤苗.
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