【摘 要】
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目的:研究黑种草子总皂苷提取物(TSNG)对人宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移、凋亡和自噬等生物学行为的影响.方法:将SiHa细胞分为空白对照组和不同浓度(0.8、0.9、1.0、1.1、1.2
【机 构】
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新疆医科大学药学院,新疆乌鲁木齐830011;新疆医科大学中心实验室,新疆乌鲁木齐830011;新疆医科大学公共卫生学院,新疆乌鲁木齐830011
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目的:研究黑种草子总皂苷提取物(TSNG)对人宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移、凋亡和自噬等生物学行为的影响.方法:将SiHa细胞分为空白对照组和不同浓度(0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.4、1.6、1.8 mg/mL)的TSNG作用组,以及10 μmol/L羟氯喹(HCQ)干预组;四甲基噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的生长抑制率;划痕实验检测细胞的相对迁移率;流式细胞术Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡率;Hoechst染色观察细胞核凋亡现象;单丹磺酰戊二胺(MDC)染色观察细胞内自噬体数量;Westernblot实验检测LC3-Ⅱ和p62蛋白表达.结果:与空白对照组相比,TSNG对细胞的生长有抑制作用且呈剂量效应关系(P<0.05或0.01);0.9、1.0、1.1 mg/mL TSNG处理组细胞相对迁移率分别为(20.40±2.49)%、(15.14±0.39)%、(5.05±1.04)%,均低于空白对照组的(36.63±2.52)%(P<0.01);1.0、1.2、1.4 mg/mL TSNG处理组细胞的凋亡率分别为(39.10±0.22)%,(68.37±0.58)%和(80.93±0.12)%,均高于空白对照组的(10.73±0.82)%(P<0.05或0.01);与空白对照组比较,TSNG处理组细胞核表现出凋亡现象细胞数量增多,且细胞内自噬体数量增加,LC3-Ⅱ和p62蛋白表达上升(P<0.05或0.01);相较于TSNG作用组,HCQ预处理组LC3-Ⅱ蛋白表达无显著变化(P>0.05).结论:TSNG对SiHa细胞体外增殖、迁移表现出明显的抑制作用,并在诱导细胞凋亡的同时阻断细胞自噬流.
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