【摘 要】
:
目的 研究NEDD9在神经胶质瘤中的表达及NEDD9基因沉默对人胶质瘤U251细胞增殖与侵袭的影响.方法 选取手术切除的脑胶质瘤组织36例及正常脑组织10例,采用qRT-PCR和Western blot法检测各组脑组织中NEDD9mRNA和蛋白表达情况,构建靶向NEDD9的shRNA重组慢病毒载体,将慢病毒载体转染U251细胞,应用qRT-PCR与Western blot方法检测NEDD9mRNA与蛋白表达,MTT方法检测转染后U251细胞活力的变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 脑
【机 构】
:
中国医科大学附属第一医院神经外科,辽宁沈阳,110001
论文部分内容阅读
目的 研究NEDD9在神经胶质瘤中的表达及NEDD9基因沉默对人胶质瘤U251细胞增殖与侵袭的影响.方法 选取手术切除的脑胶质瘤组织36例及正常脑组织10例,采用qRT-PCR和Western blot法检测各组脑组织中NEDD9mRNA和蛋白表达情况,构建靶向NEDD9的shRNA重组慢病毒载体,将慢病毒载体转染U251细胞,应用qRT-PCR与Western blot方法检测NEDD9mRNA与蛋白表达,MTT方法检测转染后U251细胞活力的变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 脑胶质瘤组织NEDD9的蛋白与mRNA表达水平显著高于正常脑组织.成功建立了稳定沉默NEDD9基因的U251细胞株,与空白对照组及阴性对照组比较,转染NEDD9-shRNA组U251细胞活力与侵袭能力显著降低(P<0.01).结论 NEDD9可能是治疗胶质瘤U251细胞的潜在靶点.
其他文献
目的 观察SASH1和p-ERK在乳腺浸润性导管癌组织和正常乳腺组织中的表达,探讨其与乳腺浸润性导管癌生物学行为和预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测100例乳腺浸润性导管癌及40例正常乳腺组织中SASH1和p-ERK的表达,并结合肿瘤临床病理特征进行分析.Western blot方法检测20例新鲜乳腺浸润性导管癌组织及10例新鲜正常乳腺组织中SASH1和p-ERK的表达水平;实时荧光定量PCR方法检测两组SASH1mRNA和p-ERK mRNA的表达水平.结果 SASH1蛋白在乳腺癌组织表达率(3
目的 探讨miR-187对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及其机制.方法 将体外培养的U251细胞分为Con组(未处理)、NC组(转染miR-NC)、miR-187组(转染miR-187 mimics)
目的 探讨藤黄酸对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡、迁移及ASK-1、p-ASK-1、JNK、p-JNK表达的影响.方法 将人结肠癌HT-29细胞分为空白对照组与藤黄酸组(0.5、1.0、2.5、5.0μmol/ml).不同浓度藤黄酸干预24、48、72h后,MTT方法检测藤黄酸对HT-29细胞增殖的抑制作用.2.5μmol/ml藤黄酸干预48 h后,流式细胞术检测HT-29细胞的凋亡率;划痕实验检测藤黄酸对HT-29细胞迁移能力的影响;Western blot实验检测藤黄酸对HT-29细胞JNK、p-J
膝关节结构复杂,起着支撑身体的杠杆性作用,但在众多的外界因素尤其是体育运动中损伤的几率较大[1].在膝关节损伤临床治疗中多采用手术治疗,特别是关节镜的手术方式应用较为广泛[2].因此让医学生和基层医院的骨科医生充分理解膝关节解剖结构及病理生理过程,熟练掌握微创外科手术技能,成为现今医学院校解剖实验课及临床医生培训的重点和热点.
目的 探讨miR-590-3p通过调控Dicer1对鼻咽癌细胞侵袭转移的影响及其作用机制.方法 收集2017年8月-2019年2月于我院经手术切除且被证实为鼻咽癌的组织标本以及对应的癌旁组织标本各40例,RTFQ-PCR检测miR-590-3p在鼻咽癌组织及癌旁组织、人鼻黏膜上皮细胞(HNEpC)、鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-1-mimics-miR-590-3p及阴性对照CNE-1-mimics-NC中的表达情况.Western blot检测Dicer1在各细胞株中的表达.生物信息学预测及双荧光素酶
目的 探究慢病毒介导TREM-2质粒转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究.方法 利用基因过表达技术,构建TREM-2过表达载体,慢病毒转染骨髓间充质干细胞(BMSCs),利用流式细胞仪检测BMSCs的表面蛋白,利用RT-PCR和Western blot检测神经细胞表面蛋白胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)以及神经丝蛋白(neurofilament protein
目的 研究lncRNA HOTAIR在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖和自噬的影响,探讨lncRNAHOTAIR调控胃癌细胞自噬的机制.方法 收集2015年1月-2017年12月于中国医科大学附属肿瘤医院确诊为胃癌的60例癌组织及其配对癌旁组织;实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测HOTAIR表达水平,CCK-8实验检测si-HOTAIR及si-ATG3对细胞增殖影响,蛋白免疫印迹实验检测HOTAIR对细胞自噬水平及ATG3表达水平影响,免疫荧光实验检测HOTAIR对胃癌细胞自噬的影响.结果 HOTAI
目的 探讨大黄素对哮喘小鼠炎症反应及对肺组织中NOD样受体蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)和胱冬肽-1(caspase-1)表达的影响.方法 36只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组和大黄素组.以卵蛋白为致敏原制备哮喘小鼠模型.收集肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数和分类
目的 观察4-苯基丁酸对创伤性脑损伤的保护作用及机制.方法 将C57BL/6小鼠分为假手术组(Sham),创伤性脑损伤模型组(TBI)和4-PBA治疗组(4-PBA);TBI和4-PBA采用开放性脑刺伤方法建立TBI模型;观察并记录神经功能损伤评分;干湿法检测各组小鼠脑含水量;HE染色检测脑病理组织学变化;免疫荧光染色检测各组小鼠大脑皮层处胶质细胞的活化;TUNEL染色观察脑组织凋亡;Western blot检测GRP78、ATF-6、p-PERK的蛋白表达.结果 4-PBA有效降低创伤性脑损伤小鼠神经功
目的 探讨舒芬太尼联合右美托咪啶对脊髓损伤大鼠的治疗及可能机制.方法 Allens法建立脊髓损伤模型,将SD大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)和舒芬太尼与右美托咪啶联合治疗组(SD组);对各组大鼠脊髓运动功能(BBB)进行评分;应用HE染色检测各组大鼠脊髓的组织病理学变化;采用ELISA检测IL-10、IL-6及TNF-α水平变化;化学方法检测各组大鼠脊髓组织中MDA、CAT、SOD、GSH-Px等蛋白的表达情况;IHC检测各组脊髓组织中的HMGB1、TLR4表达;Westem blot法