Id1真核表达载体的构建及胃黏膜上皮细胞系的转染

• 作 者: 韩霜 丁杰 郭长存 韩者艺 申慧琴 陈瑜 扎西措姆 乔泰东
• 机 构: 第四军医大学西京医院全军消化病研究所
• 出 处: 第四军医大学学报
• 发表日期: 2004年4期
• 关键词: 胃肿瘤 ID1 遗传载体 stomach neoplasms Id1 genetic vectors
• 基金项目: 国家自然科学基金，军队科研项目

目的: 扩增Id1基因,构建Id1真核表达载体pcDNA3.1/V5HisA-Id1. 方法: 以胃癌细胞SGC7901cDNA为模板,以Id1基因编码区外的两段特异性序列为引物,获得Id1基因的全长. 将目的基因插入载体pUCm-T,经序列测定证实后,亚克隆至pcDNA3.1/V5HisA并经酶切鉴定. 采用脂质体转染的方法将重组质粒稳定转染至胃粘膜上皮永生化细胞系GES-1中. 结果: 经RT-PCR方法扩增出大小为608 bp的基因片断,序列测定其编码序列及读框正确. 亚克隆经酶切鉴定正确. 经过8