趋化因子受体6在食管癌组织的表达及对食管癌细胞上皮-间充质转化的影响

• 作 者: 刘检 邓海峰 徐斌 郑晓 陈陆俊 王琦 张大川 朱大伟 朱一蓓 陶敏 吴昌平 卢斌峰 蒋敬庭
• 机 构: 213003 常州，苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心 江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心,213003 常州，苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心 江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心,213003
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2018年35期
• 关键词: 趋化因子受体6 食管鳞状细胞癌 上皮-间充质转化 淋巴结转移

目的

观察趋化因子受体6(CCR6)在食管癌组织的表达及其对食管癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。

方法

应用免疫组织化学技术检测99例食管鳞状细胞癌和11例食管正常组织中CCR6、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达，分析其与临床病理特征的相关性。应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人食管癌细胞株ECA-109、TE-1及正常食管细胞株HEEC中CCR6的表达。应用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕和Transwell实验检测CCR6对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。应用RT-qPCR和Western blot实验测定CCR6-CCL20趋化作用对食管癌细胞EMT的影响。

结果

CCR6在食管癌细胞株中高表达与正常食管细胞株中低表达，差异有统计学意义(8.00±1.23、4.57±1.12比1.00±0.32，t＝11.000，P＝0.000；t＝6.100，P＝0.001)。CCR6在淋巴结转移组和未转移组的阳性表达率分别为87.1%和63.8% (P＝0.020)；在TNM分期级别高组和级别低组的阳性表达率分别为87.9%和62.5% (P＝0.038)。食管癌细胞经CCL20刺激后，增殖能力显著降低，差异有统计学意义(0.35±0.02比0.49±0.03，t＝7.003，P＝0.002；0.38±0.033比0.48±0.04，t＝3.719，P＝0.021)。ECA-109划痕24 h后，CCL20组的愈合速度显著升高，差异有统计学意义(1.34±0.02比1.00±0.04，t＝4.680，P＝0.009)，封闭CCR6，愈合速度明显降低(1.36±0.06比1.00±0.04，t＝4.344，P＝0.012)。ECA-109细胞Transwell实验结果显示：CCL20组细胞穿膜数量显著增高，差异有统计学意义(401.33±20.00比239.33±21.18，t＝5.560，P＝0.005)；封闭CCR6后，穿膜细胞数量显著降低(311.33±12.12比401.33±20.00，t＝3.849，P＝0.018)。CCL20刺激后，ECA-109中E-cadherin的mRNA和蛋白表达显著降低(t＝9.758，P＝0.001)、Vimentin的表达显著升高(t＝6.352，P＝0.003)；封闭CCR6，E-cadherin的mRNA和蛋白表达显著升高(t＝7.707，P＝0.002)、Vimentin表达显著降低(t＝6.095，P＝0.004)。

结论

CCR6在食管癌淋巴结转移患者中呈高表达，CCR6及CCR6-CCL20趋化轴参与调控肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，可能参与调节食管癌细胞EMT的发生。