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色氨酸（Trp）在350nm处产生一个荧光峰，在700nm处产生一个（分额）荧光峰，此两峰荧光强度F350nm和F700nm均与Trp浓度（0-1×10^-5mol·L^-1）成线性关系，随着Trp浓度增大，350和700nm半峰宽（Δλ）350，（Δλ）700缓慢减小，而F700nm/F350nm值和半峰宽比（Δλ）700/（Δλ）350为一常数，此两峰具有相似的荧光特性。根据建立的分频荧光能级原理和非线性共振分频荧光原理探讨了色氨酸分频荧光峰产生的原因。