【摘 要】
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目的 对不明原因死亡虎进行病毒感染检测,并对病毒部分保守基因序列进行分析.方法 采集不明原因病死虎肺组织,研磨后提取总DNA,使用特异性引物对伪狂犬病毒gB基因、gD基因进
【机 构】
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甘肃农业大学,甘肃 兰州 730070;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省人兽共患病重点实验室,吉林 长春 130122;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,农业部动物流感重
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目的 对不明原因死亡虎进行病毒感染检测,并对病毒部分保守基因序列进行分析.方法 采集不明原因病死虎肺组织,研磨后提取总DNA,使用特异性引物对伪狂犬病毒gB基因、gD基因进行PCR扩增、测序并构建进化树;经负染法染色后用电子显微镜观察病毒形态结构;取研磨组织液接种家兔,观察病毒的致病力.结果 PCR扩增组织样品为gB基因、gD基因阳性,基因序列经blast比对伪狂犬病毒.将gB基因通过序列测定分析并与GenBank中近4年公布的9株伪狂犬病毒gB基因比对,同源性为99.5％～100％.进化树分析该病毒与2012年北京家猪分离株属同一进化分支.组织研磨液置电镜观察,见病毒呈圆形,直径100 nm左右,有囊膜,为具有典型特征的疱疹病毒样病毒粒子.家兔接种组织研磨液后出现啃咬接种部位,抽搐,嘶叫等伪狂犬病症状.结论 本研究在病死虎体内检测到伪狂犬病毒,表明濒危野生动物虎已受到伪狂犬病毒病的威胁.
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