凝血酶对食管癌细胞株Eca109恶性生物学行为的影响

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目的

研究凝血酶对食管癌细胞株Eca109增殖、侵袭等恶性生物学行为的影响,并初步探讨其可能机制。

方法

分别应用四甲基偶氮唑盐(MTT)和Transwell方法检测凝血酶对Eca109细胞增殖和侵袭能力的影响,明胶酶谱法检测凝血酶对Eca109细胞培养上清液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9活性的影响,反转录聚合酶链反应(PCR)及细胞免疫荧光法分别检测Eca109细胞中凝血酶重要受体蛋白酶活化受体1(PAR-1)mRNA的表达及PAR-1蛋白的亚细胞定位。

结果

凝血酶能够促进Eca109细胞的增殖,并呈剂量依赖性,0.5 U/ml和1.0 U/ml凝血酶组Eca109细胞增殖率分别为34.38%和57.19%(P<0.05)。1.0 U/ml凝血酶组Eca109细胞穿过Transwell小室基底膜的细胞数多于对照组[(303.33±6.66)个比(116.33±11.51)个,P=0.000]。经不同浓度凝血酶作用24 h,Eca109细胞上清液中MMP-2、MMP-9活性有不同程度的增强,以MMP-9为著。Eca109细胞中有PAR-1 mRNA的表达,且PAR-1蛋白主要分布在细胞膜上。

结论

凝血酶能够提高食管癌Eca109细胞增殖及侵袭能力,增强Eca109细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9活性,这些作用可能是通过活化细胞膜表面PAR-1实现的。

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