【摘 要】
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目的 开发一套基于酸处理的产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)选择性增菌方法,提高食品中STEC菌株的检出率.方法 选择12株不同血清型STEC菌株及13株常见干扰菌,评价其对不同酸处理条件(pH=2.0、2.5、3.0)的耐受性;考察筛选的酸处理条件对营养胁迫和冷冻胁迫状态STEC菌株生长活性的影响;比较研究酸水解酪蛋白、酵母提取物和丙酮酸钠等成分对胁迫状态STEC菌株的促生长作用,优化酸处理后中和/促生长培养基配方;比较增菌前与
【机 构】
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上海市食品药品检验研究院, 国家药品监督管理局药品微生物检测技术重点实验室, 上海 201203
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目的 开发一套基于酸处理的产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)选择性增菌方法,提高食品中STEC菌株的检出率.方法 选择12株不同血清型STEC菌株及13株常见干扰菌,评价其对不同酸处理条件(pH=2.0、2.5、3.0)的耐受性;考察筛选的酸处理条件对营养胁迫和冷冻胁迫状态STEC菌株生长活性的影响;比较研究酸水解酪蛋白、酵母提取物和丙酮酸钠等成分对胁迫状态STEC菌株的促生长作用,优化酸处理后中和/促生长培养基配方;比较增菌前与增菌后2种酸处理方式对STEC菌株分离效果的影响;最后通过人工污染样品,评价本研究建立的STEC酸处理选择性增菌方法的检测效果.结果 本研究建立了一种不依赖于抑菌成分的STEC选择性增菌方法,样品在增菌前经酸处理培养基室温处理2 h,降低背景杂菌干扰,再通过中和/促生长培养基[胰蛋白胨大豆肉汤培养基(tryptone soybean broth,TSB)-1.5％Tris-0.1％丙酮酸钠]进行目标菌的增菌培养;人工污染试验结果表明,本方法与我国现行GB 4789.36—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》标准方法相比,能够有效减少背景杂菌的干扰、获得更高的STEC分离效率.结论 本研究建立的基于酸处理的STEC选择性增菌方法能够有效提高食品中STEC菌株的检测效率和检测准确性.
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