【摘 要】
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目的 文章对刺老苞根皮进行化学成分及其对原代破骨细胞影响研究.方法 采用大孔吸附树脂、硅胶柱、ODS-C18以及制备型HPLC等方法进行分离纯化,结合理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.体外培养原代破骨细胞,采用抗酒石酸酸性磷酸酶阳性染色及骨吸收甲苯胺蓝染色进行鉴定.CCK-8细胞毒性检测法、TRAP阳性细胞数实验及Real-timePCR(RT-PCR)与Western blot法测定骨保护素(osteoprotegerin,OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(recep-tor activator
【机 构】
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中央民族大学,民族医药教育部重点实验室,北京 100081;新疆师范高等专科学校,新疆 乌鲁木齐 830043
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目的 文章对刺老苞根皮进行化学成分及其对原代破骨细胞影响研究.方法 采用大孔吸附树脂、硅胶柱、ODS-C18以及制备型HPLC等方法进行分离纯化,结合理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.体外培养原代破骨细胞,采用抗酒石酸酸性磷酸酶阳性染色及骨吸收甲苯胺蓝染色进行鉴定.CCK-8细胞毒性检测法、TRAP阳性细胞数实验及Real-timePCR(RT-PCR)与Western blot法测定骨保护素(osteoprotegerin,OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(recep-tor activator of nuclear factor kappaB ligand,RANKL)的表达情况检测化合物对破骨细胞的影响.结果 成功从刺老苞根皮70％乙醇提取物中分离鉴定了 4个化合物,分别是:屏边三七皂苷R2、楤木皂苷C、楤木皂苷A、竹节人参皂苷Ⅳa.在0～50 μg·mL-1浓度范围可排除化合物对破骨细胞抑制的假阳性结果.与对照组相比,4个化合物低、中、高浓度(0.5μg·mL-1、5 μg·mL-1、50 μg·mL-1)组OPG mRNA与蛋白表达有所升高,RANKL mRNA与蛋白表达有所降低,破骨细胞数目均有所减少,数据有统计学差异意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 从刺老苞根皮中分离得到的4个单体化合物对原代破骨细胞有一定的抑制活性,为刺老苞根皮治疗骨质疏松症的物质基础研究提供依据.
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