【摘 要】
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将重组克隆质粒(PGEM-λMZ)用EcoR I酶切后,电泳回收目的片段,克隆到经EcoR I酶切、CIAP处理的表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到的转化子经PCR鉴定和酶切
【机 构】
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中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点实验室,中国农业科学院上海家畜寄
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将重组克隆质粒(PGEM-λMZ)用EcoR I酶切后,电泳回收目的片段,克隆到经EcoR I酶切、CIAP处理的表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到的转化子经PCR鉴定和酶切分析,筛选出符合正确阅读框的重组子,构建成重组表达质粒(PET-λMZ),并在大肠杆菌BL21(DE3)表达菌中成功地表达了含目的蛋白的融合蛋白,融合蛋白的分子量约34KDa,加入IPTG诱导6h后,蛋白表达接近最高水平.表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化,SDS-PAGE检测为单一条带.经Wester
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