猪源干扰素刺激基因PPBP荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jeans
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根据猪源干扰素刺激基因PPBP(pro-platelet basic protein)基因全长序列,使用引物设计软件Primer Premier5.0设计合成特异性引物,经过PCR扩增,将基因扩增的片段连接到相应的载体上,成功构建重组质粒p3XFLAG-CMV-7.1-PPBP。重组质粒经过筛选、鉴定以及纯化后,经10倍系列稀释作为质控样品,用于实时荧光定量PCR中PPBP标准曲线的构建,并检测重复性、灵敏性和特异性。结果显示标准曲线线性关系R2〉0.99;特异性试验中也能检测到PPBP扩增曲线;组间和组
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