带新霉素抗性的萤光素酶报告载体的构建

• 作 者: 马云云 冯龙 卫艳萍 李月白 何婷玉 董子明 赵国强
• 机 构: 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州大学基础医学院生物化学教研室,郑州大学基础医学院病理生理学教研室
• 出 处: 郑州大学学报：医学版
• 发表日期: 2009年3期
• 关键词: 萤光素酶报告载体pGL3 新霉素抗性基因neo 克隆 luciferase reporter vector neomycin resistance gene n
• 基金项目: 河南省医学科技攻关基金资助项目2008002002

目的：构建带新霉素抗性的萤光素酶报告载体。方法：设计扩增新霉素抗性基因neo,克隆入萤光素酶报告载体pGL3,得到pGL3-neo。分别比较pGL3、pGL3-CMV promoter瞬时转染组和经G418筛选的pGL3-neo、pGL3-neo-CMV promoter稳定转染组细胞萤光素酶活性。结果：PCR扩增出neo表达单元;酶切和DNA测序分析鉴定得到带新霉素抗性的萤光素酶报告质粒pGL3-neo。G418筛选可获得稳定转染pGL3-neo细胞株和稳定转染pGL3-neo-CMV promoter