【摘 要】
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目的:探讨血源性单核巨噬细胞对小鼠脊髓损伤(SCI)局部巨噬细胞分化的影响.方法:将6～8周龄C57BL/6J雌鼠随机分为两组:SCI+PBS脂质体组(SCIP组)、SCI+氯磷酸二钠脂质体(Chlodrolip)组(SCIL组).两组小鼠分别注射相同剂量两种脂质体.采用流式细胞术(FCM)检测手术前外周血中单核细胞比例,确定单核细胞清除效率.在小鼠T10椎骨处制备SCI重物坠落模型.实验过程中每天对小鼠称重,SCI术后7 d称取两组小鼠脾脏重量;提取损伤脊髓附近浸润的巨噬细胞和小胶质细胞.分别以CD11
【机 构】
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徐州医科大学医学技术学院,徐州221004;蚌埠医学院检验医学院,蚌埠233030;蚌埠医学院组织移植安徽省重点实验室,蚌埠233030;蚌埠医学院组织移植安徽省重点实验室,蚌埠233030;蚌埠医学
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目的:探讨血源性单核巨噬细胞对小鼠脊髓损伤(SCI)局部巨噬细胞分化的影响.方法:将6～8周龄C57BL/6J雌鼠随机分为两组:SCI+PBS脂质体组(SCIP组)、SCI+氯磷酸二钠脂质体(Chlodrolip)组(SCIL组).两组小鼠分别注射相同剂量两种脂质体.采用流式细胞术(FCM)检测手术前外周血中单核细胞比例,确定单核细胞清除效率.在小鼠T10椎骨处制备SCI重物坠落模型.实验过程中每天对小鼠称重,SCI术后7 d称取两组小鼠脾脏重量;提取损伤脊髓附近浸润的巨噬细胞和小胶质细胞.分别以CD11b、CD68、CCR7的不同荧光抗体组合作为巨噬细胞和小胶质细胞不同状态和亚型的标志.CD68+CD11b+为活化的巨噬细胞和小胶质细胞,CD11b+CD68+CCR7+细胞为M1型巨噬细胞.用FCM检测两组小鼠脊髓损伤部位不同细胞所占比例.结果:SCIP组CD68+细胞占CD11b+细胞百分比例为(48.12±2.70)％,显著低于SCIL组(61.03±3.00)％(P＜0.05);CCR7+CD68+细胞占 CD11b+细胞百分比例为(43.15±1.79)％,显著低于 SCIL 组(59.13±1.31)％(P＜0.01);SCIL组小鼠体重量和脾脏重量较SCIP组明显下降差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:清除血源性单核巨噬细胞可导致SCI后小鼠体重量及脾脏重量减低,并使脊髓损伤局部巨噬细胞和小胶质细胞向促炎性M1方向极化.
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