【摘 要】
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目的:比较常见的4种核酸抽提方法,比较其对流行性感冒(流感)病毒检测的敏感性差异,为实验室应用和结果的评价提供依据。方法:对已确定效价的甲1型流感病毒,作10-2~10-5系列稀
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目的:比较常见的4种核酸抽提方法,比较其对流行性感冒(流感)病毒检测的敏感性差异,为实验室应用和结果的评价提供依据。方法:对已确定效价的甲1型流感病毒,作10-2~10-5系列稀释,选用Roche公司H igh Pure V iralRNA K it、QIAGEN公司的Rneasy m in i K it、国产Z生物公司RNA提取试剂盒和Invitrogen公司Trizol试剂等4种核酸提取方法提取上述标本核酸模板,采用罗氏公司的RT-PCR试剂盒,用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对其进行评价。结果:在对不同病毒拷贝数流感病毒的检测中,4种核酸提取方法以Roche公司H igh Pure V iral RNA K it提取效率最高,以此提取效率作为100%,则QIAGEN Rneasy m in i K it、Invitrogen Trizol和国产Z生物公司RNA提取试剂盒的平均提取效率依次为89.71%、75.30%、68.00%。经方差分析及t检验,4种方法之间存在显著性差异(P均<0.05)。对临床标本的检测,也获得相似结果。结论:各试剂之间提取核酸的效率存在差异,应该选择性价比较好的方法进行临床标本的实验室RNA提取。
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