【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-7(microRNA-7,miRNA-7)对中波紫外线(UVB)照射诱导的皮肤氧化应激损伤的保护性作用及其作用机制.方法 建立UVB照射诱导的人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT)
【机 构】
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西安交通大学第二附属医院皮肤科,陕西西安,710004
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目的 探讨微小RNA-7(microRNA-7,miRNA-7)对中波紫外线(UVB)照射诱导的皮肤氧化应激损伤的保护性作用及其作用机制.方法 建立UVB照射诱导的人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT)氧化应激损伤模型,脂质体转染法过表达miR-7,并设立阴性对照组(miR-NC)和空白对照组.CKK-8法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,荧光法检测细胞内活性氧自由基(ROS)的含量,Real-timePCR和Western blot检测细胞中miR-7、Keap1及Nrf2 mRNA表达.结果 与空白对照组相比,UVB模型组HaCaT细胞活性、SOD和GSH-Px活性显著下降(P均＜0.05),ROS含量显著上升(P＜0.05).miR-7过表达能显著增加HaCaT细胞活性、SOD和GSH-Px活性,同时抑制Keap1蛋白的表达,增加Nrf2蛋白表达(P均＜0.05),siRNA-Nrf2转染后能显著抑制Nrf2表达(P＜0.05),进而逆转miR-7对细胞的保护作用.结论 miR-7能削弱UVB作用下HaCaT细胞的氧化应激损伤,其机制可能与Keap1-Nrf2信号通路的活化有关.
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