β-内酰胺酶抑制剂高通量筛选模型的建立

• 作 者: 王斯文 陈向东 汪辉 石功名 郭欣 张序磊
• 机 构: 中国药科大学、生命科学与技术学院、微生物教研室
• 出 处: 中国抗生素杂志
• 发表日期: 2013年2期
• 关键词: 高通量筛选(HTS) Β-内酰胺酶 抑制剂 半数抑制浓度(IC50) High throughput screening （HTS） β-lactamase I

目的建立β-内酰胺酶抑制剂的高通量筛选模型。方法从产β-内酰胺酶菌株中提取酶液，以硝噻吩为底物，三唑巴坦作为酶抑制剂，通过检测反应体系吸光度的变化，来判断酶促反应的进行情况以及酶抑制剂的效果，建立384微孔板的高通量筛选模型，优化反应条件并对此模型进行评价。用此模型对7360个化合物组成的随机库进行筛选。结果确定反应体系条件为：最佳测定波长为482nm，反应温度为30℃，选取15min时间点检测，底物硝噻吩终浓度为0．1mmol／L，评价指标Z’因子在0．8～0．9范围内，表明此模型可以用于高通量筛选。基