结核分枝杆菌硫酸化酶基因的克隆及其原核表达、鉴定及纯化

• 作 者: 唐莉娟 马博 刘景 周鸿淼 张振
• 机 构: 巴音郭楞职业技术学院,石河子大学动物科技学院,新疆疆南牧业有限公司
• 出 处: 中国畜牧兽医文摘
• 发表日期: 2017年6期
• 关键词: 结核杆菌 硫酸化酶基因 原核表达

本文拟对结核分枝杆菌ATP硫酸化酶基因进行原核表达,并鉴定其抗原性。根据结核分枝杆菌H37Rv ATP硫酸化酶（cys D）基因设计引物,扩增出大小约为999bp的目的基因片段。将PCR纯化产物克隆至PMD18-T中,构建重组质粒载体PMD18-T-cys D。以SacⅠ和HindⅢ双酶切重组载体PMD18-T-cys D和表达载体p ET-32a（＋）,并将纯化的cys D基因亚克隆至p ET-32a（＋）中,构建出原核重组表达质粒p ET-32a-cys D。将p ET-32a-cys D重组质粒转化