美洲拟鲽抗冻肽基因在E.coli中的表达

• 作 者: 金海翎 商慧深 张庆琪 许政皑
• 机 构: 中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传学国家重点实验室,中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传学国家重点实验室上海200032,上海200032,上海200032
• 出 处: 实验生物学报
• 发表日期: 1995年1期
• 关键词: 抗冻肽 融合基因 表达 美洲拟鲽 AFP. Fusion gene. Expression induced in vivo CAT activity.

动物抗冻肽（ＡＦＰ）以降低动物体液冰点而使其能在寒冷的环境中生活，因而ＡＦＰ在防寒抗冻方面有较大的潜力。根据美洲拟鲽ＡＦＰ基因的ｃＤＮＡ序列，人工合成了ＡＦＰ及春含前导序列的ｐｒｏＡＦＰ的ｃＤＮＡ，并构建成ＰＡＦＰ及ＰＰＡＦＰ原核表达载体。由于ＡＦＰ表达量少且蛋白分子很小，用ＳＤＳ－蛋白电泳难以检测。为了提高检测的灵敏度，把报道基因ＣＡＴ的ＣＤＮＡ按读码框连接到ＡＦＰ的３＇末端，构建成融合基因表达