【摘 要】
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目的:建立人皮肤成纤维细胞的体外原代及传代培养并鉴定的技术方法。方法:取临床无菌切除的幼儿包皮,利用胶原酶分离表皮和真皮,将真皮剪成肉糜状,再用胰蛋白酶消化,接种于培
【机 构】
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四川省人民医院输血科,南充市中心医院输血科,四川大学华西药学院生化教研室,遂宁市中医院检验科,四川大学华西基础医学与法医学院
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目的:建立人皮肤成纤维细胞的体外原代及传代培养并鉴定的技术方法。方法:取临床无菌切除的幼儿包皮,利用胶原酶分离表皮和真皮,将真皮剪成肉糜状,再用胰蛋白酶消化,接种于培养皿,加少许含10%小牛血清的DMEM-高糖培养液进行培养,次日补加培养液。原代长满后,进行传代,并对所培养的细胞进行形态学观察及组化鉴定。结果:接种次日倒置镜下可见有长梭形细胞迁出、生长,5-6d进行传代,传代后约5d长满,可长期传代。免疫组化Vimentin表达阳性。结论:该方法可快速高效获得构建组织皮肤真皮所需的成纤维细胞。
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