【摘 要】
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随着工业的发展,土壤污染问题愈发严重,利用基因工程修复土壤技术备受青睐,因此,开发重金属应答中的限速酶基因,将为植物修复重金属污染的土壤提供可应用的基因资源。通过RT-
【机 构】
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天津大学环境科学与工程学院; 天津大学化工学院; 天津农学院园艺园林学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(31271793,31271419);国家转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08003-002B,2014ZX07203-009)资助项目
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随着工业的发展,土壤污染问题愈发严重,利用基因工程修复土壤技术备受青睐,因此,开发重金属应答中的限速酶基因,将为植物修复重金属污染的土壤提供可应用的基因资源。通过RT-PCR及末端克隆方法获得枸杞谷胱甘肽合成酶(Lycium chinense,Glutathione synthetase,LcGS)基因,采用半定量RT-PCR分析了枸杞LcGS在不同时间镉(Cd)胁迫下表达量的变化,LcGS表达量随着胁迫时间的延长而增强,胁迫9h、12h和24h后LcGS表达量维持在较高水平。同时构建了植物双元表达载体pCAMBIA2300-LcGS,通过农杆菌介导的方法将LcGS基因转入烟草,PCR证明了LcGS基因成功整合到烟草基因组中,在Cd处理条件下,转基因植株谷胱甘肽(glutathione,GSH)、植物螯合肽(phytochelatins,PCs)和叶绿素含量比对照组明显高,即转基因植株对重金属的耐逆性比对照组更强,因此,过表达GS植物将是植物修复重金属污染的一个有效策略。
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